Ｃｇｒｐ受容体アンタゴニスト

专利摘要:
本開示は主に、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、新規な、式Ｉ：の化合物（医薬的に許容される塩を含む）に関する。本開示ははまた、医薬組成物およびＣＧＲＰ関連疾患［片頭痛および他の頭痛、神経因性血管拡張、神経因性炎症、熱傷、循環ショック、閉経に伴う紅潮、気道炎症疾患（例えば、喘息）、および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を含む］の治療における該化合物の使用方法に関する。
公开号:JP2011516556A
申请号:JP2011504091
申请日:2009-04-03
公开日:2011-05-26
发明作者:グアンリン・ルオ
申请人:ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ；
IPC主号:C07D401-14

专利说明:

[0001] （関連出願）
本願は、２００８年４月１１日に出願した米国仮特許出願第６１／０４４１９８号の利益を主張する。]
背景技術

[0002] 本開示は主に、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストである、新規な、式Ｉの化合物（医薬的に許容される塩を含む）に関する。本開示ははまた、医薬組成物およびＣＧＲＰ関連疾患［片頭痛、神経因性血管拡張、神経因性炎症、熱傷、循環ショック、閉経に伴う紅潮、気道炎症疾患（例えば、喘息）、および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を含む］の治療における該化合物の使用方法に関する。]
[0003] カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）は、１９８２年に初めて同定された天然の３７アミノ酸ペプチドである（Amara, S.G. et al, Science 1982, 298, 240-244）。二形態のペプチドが発現され（αＣＧＲＰおよびβＣＧＲＰ）、それらは、ラットおよびヒトにおいて、それぞれ１個および３個のアミノ酸が異なっている。このペプチドは、末梢神経系（ＰＮＳ）と中枢神経系（ＣＮＳ）の両方に広く分布し、主に感覚求心性および中枢ニューロンに局在して、血管拡張を含むいくつかの生物学的効果を示す。]
[0004] ＣＧＲＰは、細胞から放出されると、特異的な細胞表面Ｇタンパク質共役受容体に結合し、主として細胞内アデニル酸シクラーゼの活性化によって、その生物学的作用を発揮する（Poyner, D. R. et al, Br J Pharmacol 1992, 105, 441-7; Van Valen, F. et al, Neurosci Lett 1990, 119, 195-8）。ペプチド断片ＣＧＲＰ（８-３７）のアンタゴニスト特性と、ＣＧＲＰの線状類似体がＣＧＲＰ２受容体を活性化できることとに基づいて、二種類のＣＧＲＰ受容体（ＣＧＲＰ１およびＣＧＲＰ２）が提唱されている（Juaneda,C. et al, TiPS 2000, 21, 432-438）。しかしながら、ＣＧＲＰ２受容体には分子的証拠がない（Brain, S.D. et al, TiPS 2002, 23, 51-53）。ＣＧＲＰ１受容体は三つの成分、すなわち（i）７回膜貫通型カルシトニン受容体様受容体（ＣＲＬＲ）；（ii）１回膜貫通型受容体活性修飾タンパク質１型（ＲＡＭＰ１）；および（iii）細胞内受容体成分タンパク質（ＲＣＰ）を持っている（Evans B.N. et al, J Biol Chem. 2000, 275, 31438-43）。細胞膜へのＣＲＬＲの輸送およびＣＧＲＰ受容体へのリガンド結合には、ＲＡＭＰ１が必要である（McLatchie, L.M. et al, Nature 1998, 393, 333-339）。シグナル伝達にはＲＣＰが必要である（Evans B.N. et al, J Biol Chem. 2000, 275, 31438-43）。ＣＧＲＰ受容体への小分子アンタゴニストの結合には種特異的な相違があることが知られており、通常、ヒト受容体の拮抗作用には、他の種よりも大きな親和性が見られる（Brain, S.D. et al, TiPS 2002, 23, 51-53）。ＲＡＭＰ１のアミノ酸配列は種選択性を決定し、特にアミノ酸残基Ｔｒｐ７４はヒト受容体の表現型を担っている（Mallee et al., J Biol Chem 2002, 277, 14294-8）。]
[0005] ＣＧＲＰに対する受容体レベルでの阻害剤は、過剰なＣＧＲＰ受容体活性化が起こっている病態生理学的状態に有用であると考えられる。これらの状態には、例えば神経因性血管拡張、神経因性炎症、片頭痛、群発頭痛および他の頭痛、熱傷、循環ショック、閉経期紅潮、および喘息などがある。ＣＧＲＰ受容体活性化は片頭痛の病理発生と関連づけられている（Edvinsson L.CNSDrugs 2001; 15(10): 745-53; Williamson, D.J. Microsc. Res. Tech. 2001, 53, 167-178; Grant, A.D. Brit. J. Pharmacol. 2002, 135, 356-362）。片頭痛中はＣＧＲＰの血清レベルが上昇し（Goadsby PJ, et al., Ann Neurol 1990; 28: 183-7）、抗片頭痛薬による処置は頭痛の緩和と同時にＣＧＲＰレベルを正常に戻す（Gallai V. et al, Cephalalgia 1995; 15: 384-90）。片頭痛患者は対照群と比較して上昇した基礎ＣＧＲＰレベルを示す（Ashina M, et al., Pain 2000, 86(1-2): 133-8. 2000）。片頭痛患者に静脈内ＣＧＲＰ注入を行うと、長時間持続する頭痛が起こる（LassenLH, et al., Cephalalgia 2002 Feb;22 (1): 54-61）。イヌおよびラットを使った前臨床試験では、ペプチドアンタゴニストＣＧＲＰ（８−３７）による全身性ＣＧＲＰ遮断は安静時体循環動態も局部血流も変化させないと報告されている（Shen, Y-T. et al, J Pharmacol Exp Ther 2001, 298, 551-8）。したがって、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、非選択的５−ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト「トリプタン」（例えば、スマトリプタン）に付随する能動的血管収縮という心血管負担を回避する新規な片頭痛治療剤になりうる。]
[0006] ＣＧＲＰアンタゴニストは、ヒト臨床試験において効果を示している。以下を参照。Davis CD, Xu C. Curr Top Med Chem. 2008 8(16):1468-79; Benemei S, Nicoletti P, CaponeJG, Geppetti P. Curr Opin Pharmacol. 2009 9(1):9-14. Epub 2009 Jan 20; Ho TW, Ferrari MD, DodickDW, Galet V, Kost J, Fan X, Leibensperger H, Froman S, Assaid C, Lines C, Koppen H, WinnerPK. Lancet. 2008 372:2115. Epub 2008 Nov 25; Ho TW, Mannix LK, Fan X, Assaid C, Furtek C, Jones CJ, Lines CR, Rapoport AM; Neurology 2008 70:1304. Epub 2007 Oct 3.]
[0007] 本発明は、技術的に優れた効果を有する。例えば化合物は新規であり、ＣＧＲＰを阻害する。また、該化合物は医薬用途にも優れる。例えば、該化合物の１もしくはそれ以上の、活性、結合、阻害効果、標的選択性、溶解性、安全性プロフィール、またはバイオアベイラビリティのメカニズムのメカニズムが優れる。]
[0008] ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、ＰＣＴ国際公開ＷＯ２００４／０９２１６６号、ＷＯ２００４／０９２１６８号、およびＷＯ２００７／１２０５９０号に開示されている。]
図面の簡単な説明

[0009] ［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ飽和／スキャッチャード分析。ＣＧＲＰアンタゴニスト実施例２０の非存在下（黒正方形）および存在下（その他）、ＳＫ−Ｎ−ＭＣ膜を用いる、［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ飽和。挿入図は、同じデータのスキャッチャードプロットを表す。]
[0010] 機能上の拮抗作用／シルド分析。ＣＧＲＰアンタゴニスト実施例２０の濃度増加（左から右、０.３から２４ｎＭ）の非存在下（白い正方形）および存在下（その他）、ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞のＣＧＲＰ用量反応（刺激されたｃＡＭＰ産生）。]
[0011] ラットにおける脳内動脈拡張の代わりとしての顔面血流量の直接検証。静脈内ｈαＣＧＲＰの静脈内送達は、ラットの中硬膜動脈直径およびラットの顔面血流量において（それぞれ、左おおび右の斜線で示した棒図）、似たようなパーセント増大をもたらす（ベースラインの１００〜１２０％）。ペプチドアンタゴニストＣＧＲＰ（８−３７）で前処理すると、いずれの測定についても（黒の棒図）、続く静脈内のｈαＣＧＲＰ投与で５０％阻害をもたらす。脳内動脈拡張および顔面血流量を同時に、各動物において（ｎ＝５ラット）測定した。データは、平均±ＳＥＭ＊ｐ＜０.０５、＊＊ｐ＜０.０１対、対応するｈαＣＧＲＰ単独。]
[0012] 非ヒト霊長類のレーザードップラー顔面血流量における、ｈαＣＧＲＰの用量反応。ｈαＣＧＲＰ（静脈内）送達は、非ヒト霊長類（例えば、コモンマーモセット）のレーザードップラー顔面血流量における用量依存的増加をもたらす。動物（ｎ＝６）に、３０分間隔で、ｈαＣＧＲＰの用量増加を与えた。データは、各動物を自身のコントロールとしてベースライン±ＳＥＭからのピーク％変化である。]
[0013] 本発明は、一連のＣＧＲＰアンタゴニスト化合物（医薬的に許容される塩、組成物、それらの製法、およびそれらを治療において使用する方法を含む）を包含する。]
[0014] １つの態様において、本発明は式Ｉ：



［式中、
Ｒ１は、水素、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルキルＳＯ２、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｎ−アルキルピペラジニル、またはモルホリニルであり；
Ｒ２は、



からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであるか；またはＲ２は、



であり；
Ｒ３は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、またはハロアルコキシであり；
Ｒ４は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、またはハロアルコキシであり；
Ａｒ１は、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、およびアルキルＳＯ２からなる群より選択される０〜３個の置換基で置換されたフェニルであり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びに
Ｙは、結合、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨである］
の化合物またはその医薬的に許容される塩である。]
[0015] 別の態様において、本発明は、
Ｒ１が、水素、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであり；
Ｒ２が、



からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであり；
Ｒ３が、水素またはハロであり；
Ｒ４が、水素またはハロであり；
Ａｒ１が、０〜２個のハロで置換されたフェニルであり；
Ｘが、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びに
Ｙが、Ｏである、
式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩である。]
[0016] 別の態様において、本発明は、
Ｒ１が、水素、シアノ、アミノ、ジメチルアミノ、またはｔ−ブチルアミノであり；
Ｒ２が、



からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであり；
Ａｒ１が、フェニルまたはジフルオロフェニルであり；
Ｘが、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びに
Ｙが、Ｏである、
式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩である。]
[0017] 別の態様において、本発明は、Ｒ１が水素またはシアノである、式Ｉの化合物である。]
[0018] 別の態様において、本発明は、Ｒ２がＮ−ピペリジニルであって４−置換された、式Ｉの化合物である。]
[0019] 別の態様において、本発明は、Ｒ２がＮ−ピペリジニルであって、



から選択された置換基で４−置換された、式Ｉの化合物である。]
[0020] 別の態様において、本発明は、Ａｒ１が２個のハロ置換基で置換されたフェニルである、式Ｉの化合物である。]
[0021] 別の態様において、本発明は、Ａｒ１が２，３−ジフルオロフェニルである、式Ｉの化合物である。]
[0022] 別の態様において、本発明は、ＸがＯである、式Ｉの化合物である。]
[0023] 別の態様において、本発明は、以下の立体化学：



を有する、式Ｉの化合物である。]
[0024] 別の態様において、本発明は、式ＩＩ：



［式中、
Ｒ２は、ピペリジニルであって、



からなる群より選択される１個の置換基で置換されるか；またはＲ２は、



であり；
Ｒ３は、水素またはアルキルであり；
Ｒ４は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、またはハロアルコキシであり；
Ａｒ１は、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、およびハロアルコキシからなる群より選択される０〜３個の置換基で置換されたフェニルであり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＲ３であり；
Ｙは結合、メチレン、Ｏ、またはＮＲ３である］
の化合物またはその医薬的に許容される塩である。]
[0025] 任意の記号（Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａｒ１、Ｘ、およびＹを含む）のいかなる範囲も、記号の他のいずれの場合の範囲と独立に用いることができる。例えば、本発明には異なる態様の組合せが含まれる。]
[0026] 特に断りがなければ、これらの用語は以下の意味を有する。「アルキル」は、１〜６の炭素、好ましくは１〜３の炭素からなる、直鎖または分岐鎖のアルキル基を意味する。「アルケニル」は、少なくとも１つの二重結合を有する、２〜６の炭素からなる、直鎖または分岐鎖のアルキル基を意味する。「シクロアルキル」は、３〜７の炭素からなる単環式環系を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「アルコキシ」、および置換されたアルキル部位を有する他の用語は、アルキル部位に関して１〜６の炭素原子からなる、直鎖および分岐鎖の異性体を含む。「ハロアルキル」および「ハロアルコキシ」は、モノハロ置換アルキルからペルハロ置換アルキルまでの全てのハロゲン化異性体を含む。「アリール」は、炭素環およびヘテロ環芳香族環系を含む。「アミノ」は、一級、二級、および三級アミン部位を含む。「カルボニル」は、ＣＯを意味する。「オキシ」は、−Ｏ−を意味する。「アミノカルボニル」は、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝Ｏ）−を意味する。「オキシカルボニル」は、−ＯＣ（＝Ｏ）−を意味する。「メチレンカルボニル」は、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−を意味する。「アミノ（シアノ）イミノメチル」は、−ＮＨＣ（＝ＮＣＮ）−を意味する。括弧でくくった用語および複数の括弧でくくった用語は、当業者に結合関係を明確にするためである。例えば（（Ｒ）アルキル）の用語は、アルキル置換基がさらにＲの置換基で置換されていることを意味する。]
[0027] 本発明には、本化合物のあらゆる医薬的に許容される塩の形態が含まれる。医薬的に許容される塩は、対イオンが本化合物の生理学的活性または毒性に対して著しく寄与せず、そのような機能が医薬的に同等である塩である。これらの塩は、市販品として入手可能な試薬を用いて、一般的な有機化学技術によって作ることができる。いくつかの陰イオン塩の形態には、酢酸塩、アシストラート、ベシル酸塩、臭化物塩、塩化物塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グロコウロネート（glucouronate）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヨウ化物塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシレート、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、およびキシナホ酸塩が含まれる。いくつかの陽イオン塩の形態には、アンモニウム塩、アルミニウム塩、ベンザチン塩、ビスマス塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、リチウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、４−フェニルシクロヘキシルアミン塩、ピペラジン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、および亜鉛塩が含まれる。]
[0028] 本発明の化合物のいくつかは立体異性体型で存在してもよく、その１つの例を以下に示す。本発明には、本化合物のあらゆる、立体異性体型および互変異性体型が含まれる。]
[0029] （合成方法）
本化合物は、当技術分野で周知の方法（以下に記載する方法および当技術分野の範囲内にある様々なバリエーションを含む）によって作ることができる。いくつかの試薬および中間体は、周知である。他の試薬および中間体は、容易に入手可能な物質を用いて、当技術分野で周知の方法によって作ることができる。以下の方法はそれを例示するためのものであって、本発明の範囲を制限するためのものではない。当業者が認識していることだが、これらの化合物の合成に利用可能な方法は多くあるし、またそれらの化合物の合成は以下に例示される方法に限定されるものではない。化合物およびそれらを作る手順が例示されていないバリエーションも、当技術分野の範囲内にある。合成スキームの中で一般的な構造式および態様を説明するためのバリエーションと、特許請求の範囲または明細書の他の箇所のバリエーションとでは、異なるし、また混同されるべきではない。これらのバリエーションは、本化合物のいくつかをどのように作るか例示するに過ぎない。]
[0030] スキームで用いる略語は、概ね、当該技術分野の慣例に従う。本明細書および実施例で用いる化学的略語は、以下のように定義する：
「ＮａＨＭＤＳ」は、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド；
「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
「ＭｅＯＨ」は、メタノール；
「ＮＢＳ」は、Ｎ−ブロモコハク酸イミド；
「Ａｒ」は、アリール；
「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸；
「ＬＡＨ」は、水素化アルミニウムリチウム；
「ＢＯＣ」・「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシド；
「ｈ」は、時間；
「ｒｔ」は、室温または保持時間（文脈で指示）；
「ｍｉｎ」は、分；
「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチル；
「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフラン；
「ＥＤＴＡ」は、エチレンジアミンテトラ酢酸；
「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテル；
「ＤＭＡＰ」は、４−ジメチルアミノピリジン；
「ＤＣＥ」は、１，２−ジクロロエタン；
「ＡＣＮ」は、アセトニトリル；
「ＤＭＥ」は、１，２−ジメトキシエタン；
「ＨＯＢｔ」は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物；
「ＤＩＥＡ」は、ジイソプロピルエチルアミン；
「Ｎｆ」は、ＣＦ３（ＣＦ２）３ＳＯ２−；および
「ＴＭＯＦ」は、オルトギ酸トリメチル。]
[0031] 以下のスキームでは、式Ｉの化合物を製造するために用いることのできる方法を例証する。スキームＩで記載する合成は、化合物ＩＩＩ（商業的に入手可能な物質から１つの工程で製造される化合物であって、文献で既知の化合物）から開始する。ＩＩＩとアリール金属試薬（例えば、ＡｒＬｉまたはＡｒＭｇＸ）との反応によってＩＶを生成することができ、それは閉環メタセシス（ＲＣＭ）の下でＶを形成することができる。第３級アルコールＶはアルケンＶＩに脱ヒドロキシル化することができ、それは標準的な脱ヒドロキシル化条件下でジオールＶＩＩを生成することができる。ジオールのモノ保護によってＶＩＩＩを得ることができ、それを酸化して保護ヒドロキシルケトンＩＸを得ることができる。アルコール、ケトン、またはα炭素を修飾する周知反応によって、別の、式Ｉの化合物を導くことができる。あるいは、ＩＸを修飾することによって、様々な、Ｘの縮合ヘテロシクロ−シクロヘプタン誘導体を生成することができる。脱保護によって対応するアルコールＸＩを得ることができ、それを活性化し、異なるアミンと反応させることによって式ＩＩの化合物（Ｘ＝Ｏ）を得ることができる。ＸＩは酸化によってケトンＸＩＩＩになることもでき、その後、炭素エロンゲーション（elongation）（Ｗｉｔｔｉｇ）、還元、および加水分解によって酸ＸＩＶとして、さらにアミド形成によって式ＩＩの化合物（Ｘ＝ＣＨ２）を得ることができる。あるいは、アルコールＸＩをアミンに変換することができ、その後、ウレア形成して式ＩＩの化合物（Ｘ＝ＮＨ）を得ることもできる。スキーム２は、式Ｉの化合物を製造するための、別の手順を提供する。この手順では、グラブス環化をして、その後、アリール部位を導入できるケトンに変換する。さらに合成を続けてアルコールを導き、次いでそれを当技術分野で周知の方法によって変換することができる。]
[0032] スキーム２は、グラブス環化を用いて、ピリド環構造と縮合したシクロヘプタン環を生成する方法をいくつか記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0033] スキーム３は、グラブス環化を用いて、ピリド環構造と縮合したシクロヘプタン環を生成する別の方法を記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0034] スキーム４は、ピリド環構造と縮合したシクロヘプタン環を生成し、その後、ジケト中間体を選択的に還元するための、別の方法を記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0035] スキーム５は、縮合ピリドシクロヘプタンのコアに炭素リンカー（linker）を有する、式Ｉの化合物を生成する方法を記載する。]
[0036] スキーム６は、縮合ピリドシクロヘプタンのコアに別の置換基を生じさせる方法をいくつか記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0037] スキーム７は、縮合ピリドシクロヘプタンのコアに別のアリール置換基を生じさせる方法をいくつか記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0038] スキーム８は、縮合ピリドシクロヘプタンのコアに別の、窒素を介した置換基を生じさせる方法をいくつか記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0039] スキーム９は、ピリドシクロヘプタンコアのＮオキシドアナログを生成する方法をいくつか記載する。さらに合成を続けて、式Ｉの化合物が生じる。]
[0040] （生物学的方法）
（インビトロ薬理学）
組織培養
ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞は、１０％胎児ウシ血清（インビトロジェン社製）を用いて補填した培地［アール（Earle）塩およびＬ−グルタミン（インビトロジェン社製）を有する最小必須培地］中で、単層として、５％ＣＯ２下、３７℃で増殖させた。]
[0041] 細胞膜の調製
ＣＧＲＰ受容体を発現するＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞から粗膜を調製した。該細胞を、リン酸緩衝化生理食塩水（１５５ｍＭ ＮａＣｌ、３．３ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、１．１ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ７．４）を用いて２回すすぎ、低張性溶解緩衝液［１０ｍＭトリス（ｐＨ７．４）および５ｍＭＥＤＴＡを含む］中、４℃で５〜１０分間インキュベートした。該細胞をプレートからポリプロピレンチューブ（１６×１００ｍｍ）へ移し、ポリトロン（polytron）を用いてホモジナイズした。ホモジネートを３０分間、３２,０００×ｇで遠心分離した。ペレットを、０．１％哺乳動物プロテアーゼ阻害剤カルテル（シグマ製）を有する冷低張性溶解緩衝液中に再懸濁し、タンパク質濃度についてアッセイした。ＳＫ−Ｎ−ＭＣホモジネートを一定分量取り、−８０℃で保存した。]
[0042] 放射性リガンド結合アッセイ
本発明の化合物を溶解し、そして１００％ＤＭＳＯを用いて、段階希釈法を行なった。化合物の段階希釈物からのアリコートをさらに、アッセイ緩衝液［トリス−Ｃｌ（５０ｍＭ）、ｐＨ７．５、ＭｇＣｌ２（５ｍＭ）、０．００５％トリトンＸ−１００］中に２５倍で希釈し、そして９６ウェルアッセイプレート中に移した（容量５０μｌ）。［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ（ＧＥ ＨｅａｌｔｈｃａｒｅまたはＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）をアッセイ緩衝液中で７２ｐＭまで希釈し、そして容量５０μｌを各ウェルに加えた。ＳＫ−Ｎ−ＭＣ膜を解凍し、新鮮な０．１％哺乳類プロテアーゼ阻害剤カクテル（シグマ製）を用いてアッセイ緩衝液中で希釈し、そして再びホモジナイズした。ＳＫ−Ｎ−ＭＣホモジネート（７μｇ／ウェル）を容量１００μＬで加えた。次いで、アッセイプレートを、室温で２時間インキュベートした。アッセイを、過剰量の冷洗浄用緩衝液［トリス−Ｃｌ（５０ｍＭ）、ｐＨ７．５、０．１％ＢＳＡ］を加えることによって終結させ、直後に予め０．５％ＰＥＩ中に浸漬させたガラスファイバーフィルター（ワットマンＧＦ／Ｂ）を用いてろ過した。非特異的な結合は、１μＭベータ−ＣＧＲＰ（Ｂａｃｈｅｍ）を用いて決めた。タンパク質結合性放射活性は、ガンマまたはシンチレーションカウンターを用いて測定した。得られたデータを４パラメータ競合結合方程式（four parameter competitive binding equation）（ＸＬｆｉｔ ｖ２.０）で解析し、またＩＣ５０値を、放射性リガンド結合の５０％を置きかえるのに必要とする、本発明の化合物の濃度として定義した。［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰの最終アッセイ濃度は、１８ｐＭであった。［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰの平均Ｋｄは、２５.４ｐＭ。本発明の化合物は全て、少なくとも２回の別々の実験によって評価した。表１にデータの一覧を示す。]
[0043] 飽和／スキャッチャード分析
ヒトＣＧＲＰペプチドと実施例２０との相互作用の性質は、飽和結合実験を用いて詳細に研究した。［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰとＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞膜の結合増加濃度を、３００ｐＭおよび６００ｐＭの実施例２０の非存在下（コントロール条件）および存在下で測定した。飽和データは、見かけの平衡解離定数（Ｋｄ）および結合部位の最大値（Ｂｍａｘ）を評価するために（Ｐｒｉｚｍ ｖ４.０、Ｇｒａｐｈｐａｄ）、一部位（one site）結合方程式を用いて分析した。実施例２０を添加したことによる、［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ結合の結合パラメータ（Ｋｄ、Ｂｍａｘ）の影響を測定し、比較した。実施例２０は、［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ結合の最大結合部位（Ｂｍａｘ）を著しく変化させることなく、［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ結合のＫｄを用量依存的に増加させた。これは、実施例２０によってもたらされる、［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰの結合阻害の競合機構を示唆する。実施例２０を３つの別々の実験で評価した（代表的なデータセットに関しては図１を参照。［１２５Ｉ］−ＣＧＲＰ飽和／スキャッチャード分析）。] 図１
[0044] 機能上の拮抗作用／シルド分析
ＣＧＲＰ受容体複合体のアゴニスト刺激は、アデニル酸シクラーゼのＧｓ依存性活性化による環状ＡＭＰ産生（アデノシン３’５’−環状モノリン酸塩）をもたらす（Juaneda C et al., TiPS, 2000; 21:432-438）。してみると、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞中でのＣＧＲＰ誘発性の環状ＡＭＰ形成（それは自然にＣＧＲＰ受容体複合体を発現）を阻害する（DoodsH et al., Br J Pharmacol,2000; 129(3):420-423）。実施例２０の、ＣＧＲＰ誘発性ｃＡＭＰ形成をブロックする能力を、商業的に入手可能なｃＡＭＰＨＴＲＦキット（カタログナンバー：６２ＡＭ２ＰＥＣ、ＣｉｓＢｉｏＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を用いて評価した。シルド分析の形式を用いた。というのも、それは拮抗作用機構の研究が可能だからである。この形式において、ＣＧＲＰ刺激性ｃＡＭＰ産生の用量応答は、ＣＧＲＰ単独または様々な濃度の実施例２０の存在下のいずれかで得られた。手短に、実施例２０をＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞と一緒に予め１５分間、インキュベートした。様々な濃度のＣＧＲＰを加えて、該細胞を室温で３０分間、インキュベートした。該細胞を溶解試薬で溶解し、メーカーの使用説明書に従って用いたＨＴＲＦによってｃＡＭＰ濃度を決定した。既知のｃＡＭＰ量を用いて標準的な曲線を調べて、それと同時に、ＨＴＲＦとｎＭ ｃＡＭＰの比率の変換を可能とした。次いで、生じた曲線を、グローバルフィッティング（global fitting）でガッダム（Gaddum）／シルド式を個別に用いて評価した（Ｐｒｉｚｍ ｖ４.０、 Ｇｒａｐｈｐａｄ）。実施例２０は、最大反応を変えずに、ＣＧＲＰのＥＣ５０の右方移動をもたらした。全体的適合（global fit）を得るために、以下のパラメータを分けて［トップ、ボトム、ｌｏｇＥＣ５０、ヒルスロープ（Hill slope）、およびｐＡ２］、あらゆる曲線を同時に適合した。非拘束のシルドスロープを用いた、２つの別々の実験に関する全体的適合は、１.１７および０.８のシルドスロープ値に戻り、単純な競合的アンタゴニストに関する、予想される〜１のシルドスロープと整合する（方法論に関しては、Moltulsky etal., 2003, Graphpad Software Inc. を参照）。いずれの実施例２０データセット（１のシルドスロープを用いる）の平均Ｋｂも２４７±４０ｐＭ（シルドスロープでプロットした、実施例２０に関する代表的な全体的適合データセットは図２を参照。機能上の拮抗作用／シルド分析）。] 図２
[0045] （哺乳類における、小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストのインビボ有効性を評価するための終末的でない方法）
概要
カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）により引き起こされる症状（脳内動脈の神経因性血管拡張を含む）のカスケード・ブロッキングは、片頭痛治療剤として提案されているものの（Edvinsson et alCNSDrugs 2001 15:745; Benemei et al Curr Opin Pharmacol 2009 9:9）、新規な小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは種特異的な相違を示し、げっ歯類において比較的乏しい活性を有するから（Mallee et al. J Biol Chem 2002 277:14294）、インビボ有効性を評価するための新しいモデルが求められる。非ヒト霊長類（例えば、マーモセット）は、ヒト受容体の表現型の役割を担う、ＲＡＭＰ１配列中の特定のアミノ酸残基（Ｔｒｐ７４）が存在するから、ヒト様ＣＧＲＰ受容体の薬理学を有する唯一の動物として知られる（Mallee et al. J Biol Chem 2002 277:14294）。現在の片頭痛モデルは、主にラットを使用するか（Escott et al. Brain Res 1995 669:93; Williamson et al. Cephalalgia 1997 17:525）、または霊長類に対して侵襲的な終末手順であるから（Doodset al. Br J Pharmacol 2000 129:420）、非ヒト霊長類において、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストのインビボ有効性を評価するための、非侵襲的で死に至らせない（終末でない）新規モデルを開発した。三叉神経活性化は、脳内（Goadsby & Edvinsson, 1993）および顔面血流量（Doods et al., 2000）のいずれもを増加させることが知られている一方で、顔面血流量および脳内動脈拡張の間の直接的な相関関係を同一の動物で行った実証例は今まで知られていなかった。したがって、非ヒト霊長類の研究を開始する前に、同一動物において脳内動脈直径および顔面血流量の変化の両方を測定していた終末研究の脳内動脈拡張の代わりに、顔面血流量のレーザードップラー測定をラットで直接検証した（図３を参照。ラットにおける脳内動脈拡張の代わりとしての顔面血流量の直接検証）。いずれの測定においても、同様の増加が、静脈内のＣＧＲＰによって誘発され、またペプチドアンタゴニストｈαＣＧＲＰ（８−３７）によってブロックされた。次に、顔面血流量における、静脈内のＣＧＲＰ誘発変化の方法を、ｈαＣＧＲＰ（８−３７）を用いて、イソフルラン麻酔したラットで回復（recovery）モデルとして検証した。このげっ歯類が死に至らない方法（survival method）を、次に非ヒト霊長類において確立し、静脈内のＣＧＲＰ活性を決定する用量反応研究が完成した（図４を参照。非ヒト霊長類のレーザードップラー顔面血流量における、ｈαＣＧＲＰの用量反応）。ペプチドおよび小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストを用いて、非ヒト霊長類モデルを検証した。小分子アンタゴニストまたはｈαＣＧＲＰ（８−３７）での前処理は、霊長類の顔面血流量を用量依存的に、静脈内のＣＧＲＰ刺激増加を阻害した［表２を参照。非ヒト霊長類（例えば、コモンマーモセット）のレーザードップラー顔面血流量における、ＣＧＲＰ誘発増加の阻害］。アンタゴニストの後処理も、顔面血流量におけるＣＧＲＰ誘発の増加を逆転させた（示していない）。この死に至らないモデルが提供するのは、非ヒト霊長類における、またはヒト化のＲＡＭＰ１（Ｔｒｐ７４）［それは、脳内動脈直径における活性の代理マーカーとして、類似のＣＧＲＰ受容体薬理学を有する］を有する遺伝子組み換え動物における、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストの予防的および不稔（abortive）効果を評価するための、新規で、非侵襲的な回復手順である。] 図３ 図４
[0046] 動物
成体雄性および雌性の一般的なマーモセット（Callithrix jacchus）はハーラン(Harlan)から購入し、３５０〜５５０ｇを被験体として用いた。]
[0047] 麻酔および外科の準備
動物に、誘導（induction）チャンバー中でイソフルラン吸入によって麻酔をかけた（４〜５％比で誘起、１〜２．５％で保つ；Solomonらによる1999）。麻酔を顔面マスクによって、空気：酸素（５０：５０）およびイソフルランの一定の供給量を運搬することによって、または挿菅および人工呼吸（血中ガスは追跡する）によって保った。体温は、直腸プローブを有する自動温度制御表面（automated temperature controlled surface）上に置くことによって、３８±０．５℃に保った。小部位の下毛（fur）（約１．５ｃｍ平方）は、脱毛用クリーム剤および／またはシェービングクリーム剤を用いて、顔面の片側または両側から除去した。外科用部位をクリップし、そしてベタジン(betadine)を用いて調製した。静脈内ラインを、試験化合物およびＣＧＲＰ受容体アゴニストの投与のために、いずれかの利用可能な静脈中に入れ、必要ならば、血中ガスモニタリングおよび含有量分析のために血液標本（最大２．５ｍｌ、１０％）を取り出した。研究の終わりの方で、血中糖を維持するために、５％デキストロース溶液を静脈内投与した。麻酔の深さは、血圧および心拍数をそれぞれ、非侵襲的な袖口の方法（non−invasive arm cuff method）およびパルス酸素濃度計を用いて測定することによってモニターした。５〜１０ｍｇ／ｋｇの静脈内のグアネチジン（これは、必要に応じて、５ｍｇ／ｋｇ静脈内で補足する）は、繰り返し刺激誘発性の血流量変化で見られる、顔面血流量におけるピーク流量を安定化させるために与えても良い（Escottらによる1999）。微小血管血流量は、自己接着性レーザードップラー流動プローブ（self adhesive laser Doppler flow probe）を顔面の皮膚に付することによってモニターする。]
[0048] 化合物の投与
試験化合物は、静脈内（０．０１〜５ｍｌ／ｋｇ）、筋肉内（０．０１〜０．５ｍｌ／ｋｇ）、皮下（０．０１〜５ｍｌ／ｋｇ）、または経口（０．１〜１０ｍｌ／ｋｇ）に投与してもよい（Diehl et al., 2001）。ＣＧＲＰ受容体アゴニストは、静脈内（０．０１〜５ｍｌ／ｋｇ）、皮内（１０〜１００μｌ／部位）、または皮下（１０〜１００μｌ／部位）送達されてもよい。]
[0049] レーザードップラー流量計
顔面流入量のコントロール増大は、血管拡張薬（例えば、ＣＧＲＰ）（０．０５〜１００μｇ／ｋｇ、静脈内；または２〜２０ｐｍｏｌ／皮内部位）の投与によって誘発される。試験化合物またはベヒクルは、血管拡張薬の繰り返し投与の前（処置前）または後（処置後）のいずれかに投与して、予防学的なまたは治療学的な作用を評価するための能力を与える。血圧は麻酔の適当な深さを確認するために常時モニターし、そして麻酔を前処置値と一致する安定なレベルを保つために調節する。これまでのマーモセットにおける電気生理学的な研究により、記録はイソフルラン濃度に対して感受性であることが見出されているように（Solomon, 1999）、レーザードップラー流量計データの収集の間、イソフルランは０．２５〜０．７５％まで低下し得る。使用する動物の数を減少するために、血流量における、静脈注射の血管拡張薬誘発変化に対する試験化合物の影響を、単一セッションで６回まで繰り返してもよい。]
[0050] 回復
動物を、輸送ゲージに戻す。そのゲージを温度制御された表面上に置いて、十分に覚醒して移動する(ambulatory)まで動物を暖かく保つ。動物は７〜１４日休ませてから再び試験してもよく、また、動物の健康に依存するが、７〜１４日間隔で繰り返して試験してもよい。]
[0051] Diehl KH, Hull R, Morton D, Pfister R, Rabemampianina Y, Smith D, Vidal JM, van de Vorstenbosch C. を参照。物質の投与および血液の除去（ルートおよび容量を含む）に関して、良い診療指針を与える。J Appl Toxicol. 2001 Jan-Feb;21(1):15-23; DoodsH, Hallermayer G, Wu D, Entzeroth M, Rudolf K, Engel W, Eberlein W. 最初の選択的小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト（BIBN4096BS）の生理学的プロフィール。Br J Pharmacol. 2000 Feb;129(3):420-3; Edvinsson L.カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）および頭痛の病態生理学：治療的示唆。CNSDrugs 2001;15(10):745-53; Escott KJ, Beattie DT, ConnorHE, Brain SD.三叉神経節刺激はラットにおける顔面の皮膚の血流を増加させる：カルシトニン遺伝子関連ペプチドに関して主要な役割を担う。Brain Res. 1995 Jan 9;669(1):93-9; Goadsby PJ, Edvinsson L.三叉神経血管系および片頭痛：ヒトおよびネコで見られる、脳血管性および神経ペプチド変化を特定する研究。Ann Neurol. 1993 Jan;33(1):48-56; LassenLH, Haderslev PA, Jacobsen VB, IversenHK, Sperling B, Olsen J. ＣＧＲＰは片頭痛の原因となる働きをするかもしれない。Cephalalgia, 2002, 22, 54-61; Mallee JJ, Salvatore CA, LeBourdelles B, Oliver KR, Longmore J, Koblan KS, Kane SA. ＲＡＭＰ１は、非ペプチドＣＧＲＰ受容体アンタゴニストの種選択性を決定する。J Biol Chem. 2002 Feb 14 [epub ahead of print]; Solomon SG, White AJ, Martin PR. Temporal contrast sensitivity in the lateral geniculate nucleus of a New World monkey, the marmoset Callithrix jacchus, J Physiol. 1999 Jun 15;517 ( Pt 3):907-17.]
[0052] （医薬組成物および治療方法）
式Ｉの化合物は、ＣＧＲＰ受容体を阻害する。したがって、該化合物は、異常なＣＧＲＰ量に関連している症状または疾患、あるいはＣＧＲＰ量の調節によって治療効果があり得る症状または疾患を治療するのに有用である。]
[0053] してみると、本発明は別の態様において、式Ｉの化合物とともに医薬的に許容される補助剤、担体、または希釈剤を含む医薬組成物である。]
[0054] 化合物は一般に、治療上有効な量の式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む（さらに従来の賦形剤を含んでもよい）医薬組成物として提供される。治療上有効な量とは、当業者が決定する量であって、患者にとって十分な有効性を発揮するのに必要な量である。医薬的に許容される担体は、許容できる安全性プロフィールを有する、従来から知られた担体である。組成物は、カプセル剤、錠剤、口中剤、および散剤、並びに液体懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、および溶液剤など、一般的な固形剤および液状剤を全て包含する。固形組成物は持効性または徐放性製剤の剤形にすることができる。組成物は、一般的な製剤技術、並びに従来の賦形剤（例えば、結合剤および湿潤剤）およびベヒクル（例えば、水およびアルコール）を使って製造する。]
[0055] 固形組成物は、通常、投与量当たりの活性成分が約１〜約１０００ｍｇを含む投薬単位で製剤化される。固形投薬単位のいくつかの例は、０．１ｍｇ、１ｍｇ、１０ｍｇ、１００ｍｇ、５００ｍｇ、および１０００ｍｇである。液状組成物は、一般に、１〜１００ｍｇ／ｍＬの単位投薬量範囲にある。液状投薬単位のいくつかの例は、０．１ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、および１００ｍｇ／ｍＬである。]
[0056] 本発明は、経口、非経口、鼻腔内、舌下、および経皮投与法など、従来の投与様式を全て包含する。典型的には、１日投与量は０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日である。一般に、化合物の必要量は経口投与では多く、非経口投与では少ない。しかしながら、具体的な投薬レジメンは、適切な医学的判断を使って、医師により決定されるべきである。]
[0057] ＣＧＲＰに対する受容体レベルでの阻害剤は、過剰なＣＧＲＰ受容体活性化が起こっている病態生理学的状態に有用であると考えられる。これらの状態には、例えば神経因性血管拡張、神経因性炎症、片頭痛、群発頭痛および他の頭痛、熱傷、循環ショック、閉経期紅潮、および喘息などがある。ＣＧＲＰ受容体活性化は、片頭痛の病理発生に関連づけられている（Edvinsson L.CNSDrugs 2001, 15(10), 745-53; Williamson, D.J. Microsc. Res. Tech. 2001, 53, 167-178; Grant, A.D. Brit. J. Pharmacol. 2002, 135, 356-362）。片頭痛の間はＣＧＲＰの血清量が上昇し（Goadsby P. J. et al. Ann. Neurol. 1990, 28, 183-7）、抗片頭痛薬による治療は頭痛の軽減と同時にＣＧＲＰ量を正常に戻す（Gallai V. et al. Cephalalgia 1995, 15, 384-90）。片頭痛患者は、対照群と比較して上昇した基礎ＣＧＲＰ量を示す［Ashina M. et al., Pain 2000, 86(1-2), 133-8］。片頭痛患者に静脈内ＣＧＲＰ注入を行うと、長時間持続する頭痛が起こる（LassenLHet al., Cephalalgia 2002, 22(1):54-61）。イヌおよびラットを使った前臨床試験では、ペプチドアンタゴニストＣＧＲＰ（８−３７）による全身性ＣＧＲＰ遮断は、安静時体循環動態も局部血流も変化させないと報告されている（Shen, Y-T. et al., J Pharmacol Exp Ther 2001, 298, 551-8）。したがって、ＣＧＲＰ受容体アンタゴニストは、非選択的５−ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト「トリプタン」（例えば、スマトリプタン）に付随する能動的血管収縮という心血管負担を回避する、新規な片頭痛治療剤となり得る。]
[0058] 別の態様において、本発明は、ＣＧＲＰ受容体を式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩と接触させることを特徴とする、ＣＧＲＰ受容体の阻害方法である。]
[0059] 別の態様において、本発明は、治療上有効な量の式Ｉの化合物を患者に投与することを特徴とする、ＣＧＲＰの異常量に関連する症状の治療方法である。]
[0060] 別の態様において、本発明は、ＣＧＲＰの異常量に関連する症状の治療剤の製造における、式Ｉの化合物の使用である。]
[0061] 別の態様において、本発明は、片頭痛または頭痛の治療方法である。]
[0062] 別の態様において、本発明は、炎症（特に、神経因性炎症）、疼痛、熱傷、循環ショック、糖尿病、レイノー症候群、末梢動脈不全、くも膜下／頭蓋内出血、腫瘍成長、閉経に伴う紅潮、および他の症状［その治療が、本明細書で定義する、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の投与によって、ＣＧＲＰ受容体の拮抗作用によって効果があり得る症状］の治療方法に関する。]
[0063] 別の態様において、本発明は、以下：
（ａ）腸粘膜における免疫調節、
（ｂ）心臓アナフィラキシー傷害からの保護効果、
（ｃ）骨吸収のインターロイキン−１b（ＩＬ−１b）刺激を、刺激または防止すること、
（ｄ）脊髄ニューロンにおけるＮＫ１受容体の発現調整、および
（ｅ）喘息を含む気道炎症性疾患および慢性閉塞性肺疾患、
からなる群より選択される方法に関する。以下を参照：(a) Calcitonin Receptor-Like Receptor Is Expressed on Gastrointestinal Immune Cells. Hagner, Stefanie; Knauer, Jens; Haberberger, Rainer; Goeke, Burkhard; Voigt, Karlheinz; McGregor, Gerard Patrick. Institute of Physiology, Philipps University, Marburg, Germany. Digestion (2002), 66(4), 197-203; (b) Protective effects of calcitonin gene-related peptide-mediated evodiamine on guinea-pig cardiac anaphylaxis. Rang, Wei-Qing; Du, Yan-Hua; Hu, Chang-Ping; Ye, Feng; Tan, Gui-Shan; Deng, Han-Wu; Li, Yuan-Jian. School of Pharmaceutical Sciences, Department of Pharmacology, Central South University, Xiang-Ya Road 88, Changsha, Hunan, Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology (2003), 367(3), 306-311; (c) The experimental study on the effect calcitonin gene-related peptide on bone resorption mediated by interleukin-1. Lian, Kai; Du, Jingyuan; Rao, Zhenyu; Luo, Huaican. Department of Orthopedics, Xiehe Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Peop. Rep. China. Journal of Tongji Medical University (2001), 21(4), 304-307, (d) Calcitonin gene-related Peptide regulates expression of neurokinin1 receptors by rat spinal neurons. Seybold VS, McCarsonKE, MermelsteinPG, Groth RD, Abrahams LG. J. Neurosci. 2003 23 (5): 1816-1824. epartment of Neuroscience, University of Minnesota, Minneapolis, Minnesota 55455, and Department of Pharmacology, Toxicology, and Therapeutics, University of Kansas Medical Center, KansasCity, Kansas 66160 (e) Attenuation of antigen-induced airway hyperresponsiveness inCGRP-deficient mice. Aoki-Nagase, Tomoko; Nagase, Takahide; Oh-Hashi, Yoshio; Shindo, Takayuki; Kurihara, Yukiko; Yamaguchi, Yasuhiro; Yamamoto, Hiroshi; Tomita, Tetsuji; Ohga, Eijiro; Nagai, Ryozo; Kurihara, Hiroki; Ouchi, Yasuyoshi. Department of Geriatric Medicine, Graduate School of Medicine, University of Tokyo, Tokyo, Japan. American Journal of Physiology (2002), 283(5,Pt. 1), L963-L970; (f) Calcitonin gene-related peptide as inflammatory mediator. Springer, Jochen; Geppetti, Pierangelo; Fischer, Axel; Groneberg, David A. Charite Campus-Virchow, Department of Pediatric Pneumology and Immunology, Division of Allergy Research, Humboldt-University Berlin, Berlin, Germany. Pulmonary Pharmacology & Therapeutics (2003), 16(3), 121-130; and (g) Pharmacological targets for the inhibition of neurogenic inflammation. Helyes, Zsuzsanna; Pinter, Erika; Nemeth, Jozsef; Szolcsanyi, Janos. Department of Pharmacology and Pharmacotherapy, Faculty of Medicine, University of Pecs, Pecs, Hung. Current Medicinal Chemistry: Anti-Inflammatory & Anti-Allergy Agents (2003), 2(2), 191-218.]
[0064] 別に態様において、本発明は、式Ｉの化合物と、ＣＯＸ−２阻害剤、ＮＳＡＩＤＳ、アスピリン、アセトアミノフェン、トリプタン、エルゴタミン、およびカフェインからなる群より選択される１以上の薬剤とを併用する、片頭痛の治療方法に関する。]
[0065] 「片頭痛」、「頭痛」、およびそれの関連用語は、医療従事者に理解されるとおりである。片頭痛は、普通型片頭痛、古典的片頭痛、群発型片頭痛、電撃性片頭痛、片麻痺性片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、および眼性片頭痛など、あらゆる種類の片頭痛を包含する。]
[0066] 「治療上有効」とは、医療従事者が理解するとおり、意味のある患者利益が存在することを意味する。]
[0067] 「患者」とは、医療従事者が決定するように、治療によって利益を得ることができる人を意味する。]
実施例

[0068] 略語は、一般的に、当該技術分野の慣例に従う。本明細書および実施例で用いる、化学用語の略語は、以下に定義する：
「ＮａＨＭＤＳ」は、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド；
「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
「ＭｅＯＨ」は、メタノール；
「ＮＢＳ」は、Ｎ−ブロモコハク酸イミド；
「Ａｒ」は、アリール；
「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸；
「ＬＡＨ」は、水素化アルミニウムリチウム；
「ＢＯＣ」・「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシド；
「ｈ」は、時間；
「ｒｔ」は、室温または保持時間（文脈に示す）；
「ｍｉｎ」は、分；
「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチル；
「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフラン；
「ＥＤＴＡ」は、エチレンジアミンテトラ酢酸；
「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテル；
「ＤＭＡＰ」は、４−ジメチルアミノピリジン；
「ＤＣＥ」は、１，２−ジクロロエタン；
「ＡＣＮ」は、アセトニトリル；
「ＤＭＥ」は、１，２−ジメトキシエタン；
「ＨＯＢｔ」は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物；
「ＤＩＥＡ」は、ジイソプロピルエチルアミン、
「Ｎｆ」は、ＣＦ３（ＣＦ２）３ＳＯ２−；および
「ＴＭＯＦ」は、オルトギ酸トリメチル。]
[0069] 本明細書で用いる略語の定義は以下：
「１×」は、１回、
「２×」は、２回、
「３×」は、３回、
「℃」は、摂氏温度、
「ｅｑ」は、当量、
「ｇ」は、グラム、
「ｍｇ」は、ミリグラム、
「Ｌ」は、リットル、
「ｍＬ」または「ｍｌ」は、ミリリットル、
「μＬ」は、マイクロリットル、
「Ｎ」は、規定濃度、
「Ｍ」は、モル、
「ｍｍｏｌ」は、ミリモル、
「ｍｉｎ」は、分、
「ｈ」は、時間、
「ｒｔ」は、室温、
「ＲＴ」は、保持時間、
「ａｔｍ」は、気圧、
「ｐｓｉ」は、ポンド毎平方インチ、
「ｃｏｎｃ．」は、濃縮、
「ｓａｔ」または「ｓａｔ’ｄ」は、飽和、
「ＭＷ」は、分子量、
「ｍｐ」は、融点、
「ｅｅ」は、エナンチオマー過剰、
「ＭＳ」または「Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃ」は、質量分析、
「ＥＳＩ」は、エレクトロスプレーイオン化質量分析、
「ＨＲ」は、高分解能、
「ＨＲＭＳ」は、高分解能質量分析 、
「ＬＣＭＳ」は、液体クロマトグラフィー質量分析、
「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィー、
「ＲＰ ＨＰＬＣ」は、逆相ＨＰＬＣ、
「ＴＬＣ」または「ｔｌｃ」は、thin 層クロマトグラフィー、
「ＮＭＲ」は、核磁気共鳴分光法、
「１Ｈ」は、プロトン、
「δ」は、デルタ、
「ｓ」は、一重項、
「ｄ」は、ニ重項、
「ｔ」は、三重項、
「ｑ」は、四重項、
「ｍ」は、多重項、
「ｂｒ」は、ブロード、
「Ｈｚ」は、ヘルツ、並びに
「α」、「β」、「Ｒ」、「Ｓ」、「Ｅ」、および 「Ｚ」は、当業者によく知られた立体化学の命名。]
[0070] 陽子磁気共鳴（１HNMR）スペクトは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＣ３００ または ＡＣ５００によって記録した。すべてのスペクトルは示された溶媒中で測定し、化学シフトは内部標準テトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのδ単位低磁場で記録し、またプロトン間カップリング定数はＨｅｒｔｚで記録する（Ｈｚ）。分裂パターンは以下のように記載する：ｓ、一重項；ｄ、ニ重項；ｔ、三重項；ｑ、四重項；ｍ、多重項；ｂｒ、ブロードピーク。低分解能質量スペクトル（ＭＳ）および見かけ上の分子（ＭＨ＋）または（Ｍ−Ｈ）＋は、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ｐｌａｔｆｏｒｍで測定した。基本的な分析結果は、重量パーセントで記録する。生成物は、カラムＹＭＣ Ｓ５ＯＤＳ（３０×１００ｍｍ）を用いて、４０.０ｍＬ／分の流速で、グラジエント時間を８.０分として、ＰｒｅｐＨＰＬＣにより精製した。精製は、４０％ＭｅＯＨ−６０％Ｈ２０−０.１％ＴＦＡの溶媒組成物から出発し、９５％ＭｅＯＨ−５％Ｈ２０−０.１％ＴＦＡの溶媒組成物で終了した。生成物は、ＸＴＥＲＡカラム（３.０×５０ｍｍ Ｓ７）を用いて、ＨＰＬＣ装置により分析し、溶媒Ａ［１０％ＭｅＯＨ-９０％水-０.１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）］から出発して、溶媒Ｂ（１０％水-９０％メタノール-０.１％ＴＦＡ）で終了し、グラジエント時間は２分であった。流速は５ｍＬ／分であり、生成物の保持時間（Ｒｆ）は２２０ｎｍの波長で測定した。]
[0071] （中間体１）



４−ヨードブタ−１−エン
オーブン乾燥した５００ｍＬの丸底フラスコ中に（ｔ＝ｇ）、トリフェニルホスフィン（２２.４０ｇ、８５ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（５.８２ｇ、８５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２００ｍＬ）を０℃で冷却して、無色の溶液を得た。ヨウ素（２１.６８ｇ、８５ｍｍｏｌ）を注意深く加えた。１５分後、３−ブテン−１−オール（７.０ｍＬ、８１ｍｍｏｌ）を滴下して加え、混合液を終夜、室温まで加温した。ＣＨ２Ｃｌ２をハウスバキューム下で除去して（ただし、熱は使用しなかった。というのも、生成物は非常に揮発性が強いから）、橙色のスラリーを得て、それをペンタンで希釈し、セライトのパッドおよびシリカゲル層を通して濾過した。次いで、溶媒を加熱することなく、ハウスバキューム下で除去した。わずかに黄色の油状物として粗製の４−ヨードブタ−１−エンを得た（１１.５１ｇ、７８％）。それを以下の反応で直接、用いた。]
[0072] （中間体２）



５−（２，３−ジフルオロフェニル）ノナ−１，８−ジエン−５−オール
５００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、粗製の４−ヨードブタ−１−エン（１１.５１ｇ、６３.２ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ溶液（１００ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。窒素下で−７８℃に冷却後、ｔＢｕＬｉ（８０ｍＬ、１３６ｍｍｏｌ）をシリンジから滴下して加えた。２時間、攪拌しながら、混合液をゆっくり室温に加温した。室温で２０分後、混合液を−７８℃に冷却し、２，３−ジフルオロ安息香酸エチル（４.２８ｍＬ、２８.７ｍｍｏｌ）をシリンジから滴下して加えた。混合液を室温で３０分かけて徐々にに加温した。反応液を水でクエンチし、揮発物を蒸発させた。残渣を水およびＥｔＯＡｃで分液処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、淡黄色の油状物を得た。最大で４０％Ｅｔ２Ｏのヘキサン溶液で精製して、目的生成物を無色の油状物として得た（１.４１ｇ、１９％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.31 - 7.22 (m, 1H), 7.10 - 7.03 (m, 2H), 5.82 - 5.70 (m, 2H), 4.97 - 4.85 (m, 4H), 2.20 - 2.00 (m, 4H), 2.00 - 1.75 (m, 4H).]
[0073] （中間体３）



（Ｚ）−１−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−４−エノール
５００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、５−（２，３−ジフルオロフェニル）ノナ−１，８−ジエン−５−オール（１.１５ｇ、４.５６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。グラブスＩＩ（０.１９３ｇ、０.２２８ｍｍｏｌ）を加え、混合液を４５℃で１９時間、加熱した。ＴＬＣは、より極性の大きい（more polar）スポットへの明瞭な変換を示した。該物質を６８９０８−１８４と合わせて、乾固するまで濃縮し、残渣を最大で５０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンで精製した。メジャーなピークをプールし、濃縮して、無色の油状物を得た（０.７６１ｇ、７４.５％）。１Ｈ ＮＭＲは大部分が目的生成物（グラブスＩ触媒を用いる、後述の合成化合物と同一）であることを示し、また、二重結合異性化されたマイナーな構成物を示した。]
[0074] （中間体４）



（Ｚ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−１−エン
１００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（Ｚ）−１−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−４−エノール（８７２ｍｇ、３.８９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１６ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。トリエチルシラン（３.１１ｍＬ、１９.４４ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＦＡ（８.００ｍＬ）を加えた。混合液を室温で２.５時間、攪拌した。ＴＬＣは、より極性の小さい（less polar）化合物への明瞭な変換を示した。それを濃縮し、最大で２０％Ｅｔ２Ｏのヘキサン溶液のＦＣＣにより精製して、目的生成物を無色の油状物として得た（７６９ｍｇ、９５％）。生成物を速やかに溶出させた。１Ｈ ＮＭＲ（メジャーなピークは、後述する合成のそれと同一である）で構造を確認した。]
[0075] （中間体５）



５−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシシクロヘプタノン［Plietker, B. J. Org. Chem. 2004, 69, 8287-8296 を参照］
５００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、炭酸水素ナトリウム（８２７ｍｇ、９.８４ｍｍｏｌ）を攪拌棒で加えた。塩化ルテニウム（ＩＩＩ）（８.１７ｍｇ、０.０３９ｍｍｏｌ）を加えた（参考文献で用いられたのは水溶液であったものの、それは完全に溶解するのが困難であった）。固形物に、水（３.９４ｍＬ）、ＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）、およびＭｅＣＮ（２０ｍｌ）を加えて、褐色の懸濁液を得た。オキソン（１.２１Ｅ＋０４ｍｇ、１９.６９ｍｍｏｌ）を一度に加え、明るい黄色の懸濁液の形で得られた。混合液を−２０℃に冷却した。（Ｚ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−１−エン（８２０ｍｇ、３.９４ｍｍｏｌ）を加えた（７.２ｍｌの１／１ ＥｔＯＡｃ／ＭｅＣＮで洗浄）。色はすぐに変わり、わずかな黄褐色になった。反応液を−２０〜−１５℃で１.５時間、攪拌した。ＴＬＣは反応を全く示さなかった。最大で０℃まで１０分間、加温したものの、ＴＬＣによれば、反応はほとんど改善されなかった。それを１５〜２０分間、室温で加温した。ＴＬＣは、メジャーでより極性の小さいスポットの１つが消失するのを示し（マイナーな方は残った）、より極性の大きい、わずかにＵＶ活性なスポットの出現を示した。固形物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機溶液をＮａＨＳＯ３水溶液で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、無色の油状物に濃縮した。
それを最大で５％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製した。より極性の大きいピークをプールし、濃縮して、無色の油状物を得た（１６９ｍｇ、１８％）。それを次の反応にそのまま用いた。]
[0076] （実施例１）



５−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−オキソシクロヘプチル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
オーブン乾燥した５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、５−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシシクロヘプタノン（２２ｍｇ、０.０９２ｍｍｏｌ）および４−ニトロフェニルクロロホルメート（２０.３０ｍｇ、０.１０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。ＤＭＡＰ（１５.６６ｍｇ、０.１２８ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で３時間、攪拌した。ＴＬＣは、新たな、より極性の小さいスポット（クロライドより極性が大きい）を示したものの、ほとんどが出発物質であった。反応液を２４時間かけて終夜、攪拌した。上記の反応混合液に、１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２（３Ｈ）−オン（５３.６ｍｇ、０.１８４ｍｍｏｌ）を加え、続いてヒューニッヒ塩基（０.０４０ｍＬ、０.２３０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を室温で終夜、攪拌した。ＬＣＭＳは２つの近い、小さなピークを示し、それは分子量が４８４であった。２２時間後、それを水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、食塩水で３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣによって、目的生成物を２つのジアスレテオマー混合物として得た（１１.７ｍｇ、２６％）。LCMS: M+H = 485.]
[0077] （中間体６）



ノナ−１，８−ジエン−５−オン
オーブン乾燥した５００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、４−ペンテノイルクロリド（６.０４ｍＬ、５４.７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（８０ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。−７８℃に冷却後、３−ブテニルマグネシウムブロミド（１１５ｍＬ、 ５７.５ｍｍｏｌ） をシリンジで ９０分かけて加えた。室温で３時間、加温した後、反応液を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチした。ＴＨＦを取り除き、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、わずかに黄色の油状物を得た。最大で４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンのＦＣＣによって精製して（２バッチ）、生成物を無色の油状物として得た（５.１３ｇ、６８％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 5.84 - 5.68 (m, 2H), 5.05 - 4.90 (m, 4H), 2.49 (t, J = 7.4 Hz, 4H), 2.35 - 2.20 (m, 4H).]
[0078] （中間体７）



５−（２，３−ジフルオロフェニル）ノナ−１，８−ジエン−５−オール
オーブン乾燥した２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、１−ブロモ−２，３−ジフルオロベンゼン（２.３０４ｍＬ、２０.５８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（６０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。−７８℃に冷却後、ＢｕＬｉ（８.２３ｍＬ、２０.５８ｍｍｏｌ）をシリンジから滴下して加えた。混合液を−７８℃で２０分間、攪拌し、ノナ−１，８−ジエン−５−オン（２.３７ｇ、１７.１５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）をカニューレから滴下して加えた（＋６ｍｌＴＨＦですすぐ）。混合液を１時間かけて室温に加温した。水でクエンチし、ＴＨＦ溶媒を取り除いた。残っている混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、黄色の油状物に濃縮した。残渣を、最大で３５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンのＦＣＣにより精製した。目的フラクションをプールし、濃縮して、生成物を無色の油状物として得た（２.３９ｇ、５５.３％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.30 - 7.22 (m, 1H), 7.10 - 7.03 (m, 2H), 5.82 - 5.70 (m, 2H), 4.97 - 4.85 (m, 4H), 2.20 - 2.00 (m, 4H), 2.00 - 1.75 (m, 4H).]
[0079] （中間体８）



（Ｚ）−１−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−４−エノール
１Ｌの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、５−（２，３−ジフルオロフェニル）ノナ−１，８−ジエン−５−オール（１.７６ｇ、６.９８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（６００ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。グラブスＩ（０.１７５ｇ、０.２０９ｍｍｏｌ）を加え、混合液を４０℃で２時間、加熱した。ＴＬＣは、より極性の大きいスポットへの明瞭な変換を示した（出発物質からの不純物が多少、残った）。６８９０８−１９８を合わせて、乾固するまで濃縮し、残渣を最大で５０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンで精製した（２回）。メジャーなピークをプールし、濃縮して、薄緑色の油状物を得た（１.４０ｇ、８９.２％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.34 - 7.25 (m, 1H), 7.08 - 7.00 (m, 2H), 5.90 - 5.80 (m, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 2H), 2.21 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.10 - 1.98 (m, 2H), 1.90 - 1.75 (m, 2H).]
[0080] （中間体９）



（Ｚ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−１−エン
２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（Ｚ）−１−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−４−エノール（２.０５ｇ、９.１４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（４０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。トリエチルシラン（７.３０ｍＬ、４５.７ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＦＡ（２０ｍＬ）を加えた。混合液を室温で３時間攪拌した。ＴＬＣは完全な変換を示した（純粋なヘキサンによる、Ｒｆ＝０.４２）。それを二層油状物に濃縮した（低い層は、ヘキサン可溶ではなかった）。ヘキサンのみを用いるＦＣＣによる精製によって、目的生成物を無色の油状物として得た（１.６８４ｇ、８８％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.00 - 6.90 (m, 3H), 5.90 - 5.82 (m, 2H), 3.20 - 3.05 (m, 1H), 2.40 - 2.15 (m, 4H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.60 - 1.40 (m, 2H).]
[0081] （中間体１０）



５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタン−１，２−ジオール［D. A. Spiegel et al. Tetrahedron 2002, 58, 6545-6554 を参照］
２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（Ｚ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタ−１−エン（１.２４９ｇ、６.００ｍｍｏｌ）およびＮＭＯ（１.５４６ｇ、１３.１９ｍｍｏｌ）の、アセトン（９ｍＬ）および水（０.１８ｍＬ）の溶液を加え、白色の懸濁液を得た。四酸化オスミウム（０.３０１ｍＬ、０.０２４ｍｍｏｌ）（２.５重量％、２−メチル−２−プロパノール溶液中）を加えた。混合液を室温で攪拌した。ＮＭＯを黄色の溶液になるまで徐々に３０分間、溶かした。１時間後、ＴＬＣは、より極性の大きいスポットへの完全な変換を示した。亜硫酸水素ナトリウム（２００ｍｇ）を加え、３０分間、連続して攪拌した。アセトンを取り除き、残渣をＥｔＯＡｃで３回、抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、白色の固形物を得た（粗重量：１.７ｇ）。それをそのまま、次の反応に用いた。]
[0082] （中間体１１）



２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタノール
２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタン−１，２−ジオール（１.４５４ｇ、６.０ｍｍｏｌ）（粗製物質、乾燥ベンゼンと共沸）のＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。ＴＢＳ−Ｃｌ（０.９９５ｇ、６.６０ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（０.９８０ｇ、１４.４０ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で５時間、攪拌した。ＴＬＣ（２／１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）は、２つの主要なスポットへの完全な変換を示した。それを水で希釈し、ＥｔＯＡｃで２回、抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、無色の油状物に濃縮した。最大で３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、ブロードなピークとして目的のモノ保護生成物を得た。生成物フラクションをプールし、濃縮して、無色の油状物を得た（１.７９ｇ、２段階で８４％）。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.02 - 6.85 (m, 3H), 3.98 - 3.70 (m, 2H), 3.18 - 3.02 (m, 1H), 2.15 - 1.82 (m, 4H), 1.80 - 1.45 (m, 4H), 0.91 (s, 9H), 0.90 (2s, 6H).]
[0083] （中間体１２、中間体１３）



（２Ｒ，５Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタノン
２５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタノール（１.７３ｇ、４.８５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。デス・マーチン・ペルヨージナン（２.２６４ｇ、５.３４ｍｍｏｌ）を一度に加え、混合液を室温で終夜、攪拌した。１７時間後、ＴＬＣは完全な変換を示した。それをＥｔ２Ｏで希釈し、乳白色の溶液が清澄になるまで４０ｍＬ飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３およびＮａ２ＨＣＯ３溶液（１／１混合）で処理した（１０分）。層を分離し、水層をＥｔ２Ｏで抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、無色の油状物に濃縮した（ヘキサンに不溶性の固形物をいくらか含む）。最大で４０％Ｅｔ２Ｏのヘキサン溶液のＦＣＣにより精製して、ピークを２つ得た。それらを別々にプールし、濃縮したより極性の小さいメジャーな方は、無色の油状物であった（９７８ｍｇ、５５％）。 1H NMR(500MHz, CDCl3) δ 7.02 - 6.90 (m, 3H), 4.34 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.82 - 2.75 (m, 2H), 2.54 - 2.46 (m, 1H), 2.45 - 2.32 (m, 1H), 2.17 - 1.98 (m, 2H), 1.90 - 1.68 (m, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.08 (s, 6H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 213.4, 150.7 (dd, J = 247.6 および 13.4 Hz), 147.8 (dd, J = 245.7 および 13.4 Hz), 137.5 (d, J = 11.5 Hz), 127.7, 122.2, 114.7 (d, J = 17.3 Hz), 79.0, 40.0, 39.2, 33.2, 30.7, 29.4, 25.8, 18.2, -5.0. より極性の大きいマイナーな方は、そのまま維持して、白色の固形物へ固形化した（６９８ｍｇ、３９％）。それをヘキサンから再結晶し、Ｘ線分析によってアンチ立体化学関係を検証した。 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.10 - 6.97 (m, 2H), 6.97 - 6.90 (m, 1H), 4.34 (dd, J = 3.0 および 9.7 Hz, 1H), 3.04 - 2.94 (m, 1H), 2.80 - 2.70 (m, 1H), 2.62 - 2.50 (m, 1H), 2.18 - 1.72 (m, 6H), 0.90 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.06 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 211.0, 150.8 (dd, J = 248.6 および 13.5 Hz), 148.1 (dd, J = 246.7 および 12.5 Hz), 136.4 (d, J = 11.5 Hz), 124.2, 122.3, 115.1 (d, J = 17.3 Hz), 78.4, 40.3, 39.4, 34.3, 33.0, 30.4, 25.9, 18.5, -4.5, -5.1.]
[0084] （中間体１４）



（６，９−アンチ）−９−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２５ｍＬフラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（２Ｓ，５Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（２，３−ジフルオロフェニル）シクロヘプタノン （２７９ｍｇ、０.７８７ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（４ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。テトラクロロ金（ＩＩＩ）酸ナトリウム二水和物（９.３９ｍｇ、０.０２４ｍｍｏｌ）およびプロパルギルアミン（０.１０１ｍＬ、１.５７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を８０℃で５時間、加熱した。黄褐色の混合液を室温に冷却した後、それをＥｔＯＡｃで希釈し、コットンプラグで濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣによって、目的生成物をメジャーなピークとして得た（６０.３ｍｇ、２０％）。それと同時に、出発物質も少し回収した。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.45 - 8.40 (m, 1H), 7.32 - 7.29 (m, 1H), 7.08 - 7.04 (m, 1H), 7.04 - 6.92 (m, 2H), 6.92 - 6.80 (m, 1H), 5.13 - 5.07 (m, 1H), 3.30 - 3.00 (m, 3H), 2.32 - 2.10 (m, 2H), 2.10 - 1.90 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.074 (s, 3H), 0.042 (s, 3H).]
[0085] （中間体１５）



（６，９−アンチ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
５０ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（６Ｒ，９Ｒ）−９−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（６０.３ｍｇ、０.１５５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。ＴＢＡＦ（０.３１０ｍＬ、０.３１０ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で終夜、攪拌した。１９時間後、ＬＣＭＳおよびＴＬＣは完全な変換を示した。ＴＨＦを取り除き、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、水、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣによって、ピークを１つ得た。それをプールし、濃縮して、白色の固形物を得た（３５.７ｍｇ、８４％）。LCMS: [M + H] = 276; 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.42 - 8.40 (m, 1H), 7.47 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.16 (dd, J = 7.2 および 5.0 Hz, 1H), 7.15 - 7.00 (m, 3H), 5.97 (br., 1H), 4.88 (dd, J = 11.6 および 1.6 Hz, 1H), 3.19 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.99 - 2.83 (m, 1H), 2.80 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.38 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.05 (m, 2H), 1.69 - 1.50 (m, 1H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 160.7, 150.8 (d, J = 247.4 Hz), 148.1 (d, J = 261.2 Hz), 145.1, 137.8, 136.5 (d, J = 12.3 Hz), 133.6, 124.2, 122.4, 122.1, 115.1 (d, J = 16.9 Hz), 71.8, 40.5, 37.6, 36.2, 35.8.]
[0086] （実施例２）



（６，９−アンチ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール（２２.２ｍｇ、０.０８１ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）および４−ニトロフェニル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９３ｍｇ、０.２４２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍＬ）を加え、黄褐色の懸濁液を得た。ＮａＨ（１９.３５ｍｇ、０.８０６ｍｍｏｌ）（過剰量）を一度に加えた。混合液を窒素下、室温で終夜、攪拌した。１８時間後、ＬＣＭＳは完全な変換を示した。それを水でクエンチし（気体発生）、ＥｔＯＡｃで抽出した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（ＬＣＭＳは水層に生成物を示さなかった）。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。最大で８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製して、生成物を白色の固形物として得た（２８.６ｍｇ、６８％）。LCMS: [M + H] = 520; 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.5 (br., 1H), 8.47 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.44 (br., 2H), 7.15 (br., 1H), 7.09 - 6.95 (m, 4H), 6.03 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.77 - 4.52 (br., 2H), 4.52 - 4.30 (br., 1H), 3.36 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 3.20 - 2.90 (m, 3H), 2.83 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.42 - 2.12 (m, 4H), 2.02 - 1.78 (m, 4H); mp 248 ℃.]
[0087] （実施例３）



（６，９−アンチ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１００ｍＬの丸底フラスコ（ｔ＝ｇ）中に、（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール（１３.５ｍｇ、０.０４９ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）および４−ニトロフェニル４−（２−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６０.４ｍｇ、０.１４７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２ｍＬ）を加え、黄褐色の懸濁液を得た。ＮａＨ（１１.７７ｍｇ、０.４９０ｍｍｏｌ）（過剰量）を一度に加えた。混合液を窒素下、室温で終夜、攪拌した。１８時間後、ＬＣＭＳは完全な変換を示した。それを水でクエンチし（気体発生）、ＥｔＯＡｃで抽出した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。最大で８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製して、生成物を白色の粉末として得た。ＬＣＭＳはマイナーなピーク（Ｍ＋Ｂｒ）を示したが、１H NMRは問題ないように見えた。ＮａＨＳＯ３のＭｅＯＨ／水溶液で２日間、処理したが、改善されなかった。物質は変化することなく、回収された（１９.５ｍｇ、７３％）。 LCMS: [M + H] = 547; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J = Hz, 1H), 7.39 (d, J = Hz, 1H), 7.12 - 6.95 (m, 5H), 6.88 (t, J = Hz, 1H), 6.72 (d, J = Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.98 (d, J = Hz, 1H), 4.60 - 4.18 (br., 3H), 3.51 (br., 2H), 3.33 (t, J = Hz, 1H), 3.15 - 2.89 (m, 6H), 2.82 (d, J = Hz, 1H), 2.32 - 2.10 (m, 3H), 2.05 - 1.89 (m, 1H), 1.89 - 1.55 (m, 4H).]
[0088] （中間体１６）



（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン１−オキシド
２５０ｍＬの丸底フラスコに、（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール（１９１ｍｇ、０.６９４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（４ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。ｍＣＰＢＡ（２０２ｍｇ、０.９０２ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で２４時間、攪拌した。ＬＣＭＳは、メジャーな生成物ピークへの完全な変換を示した。それをＥｔＯＡｃで希釈し、０.５ＮのＮａＯＨで処理した。層を分離し、有機層を水、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、蝋様の固形物／油状物を得た（粗製：１００％）。LCMS: [M + H] = 292; 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 7.24 - 6.40 (m, 5H), 5.27 (br, 1H), 3.42 - 3.02 (m, 2H), 3.02 - 2.68 (m, 2H), 2.30 - 1.95 (m, 3H), 1.80 - 1.60 (m, 1H).]
[0089] （中間体１７）



（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−２−カルボニトリル
１００ｍＬの丸底フラスコに、粗製の（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン １−オキシド（０.２０２ｇ、０.６９４ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（４ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。ジメチルカルバミルクロリド（０.０６４ｍＬ、０.６９４ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、トリメチルシリルシアニド（０.１１１ｍＬ、０.８３３ｍｍｏｌ）を加え、混合液を終夜窒素下、１６時間、攪拌した。ジメチルカルバミルクロリド（０.０６４ｍＬ、０.６９４ｍｍｏｌ）およびトリメチルシリルシアニド（０.１１１ｍＬ、０.８３３ｍｍｏｌ）を再び加えた。混合液を還流（浴温度：４５℃）で２２時間、加熱した。ＬＣＭＳは多重ピークを示し、わずかな量のｓｍしか残っていなかった。それを飽和ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。それをＴＨＦ（４ｍｌ）に溶解し、ＴＢＡＦ（０.６９４ｍＬ、０.６９４ｍｍｏｌ）で４時間、処理した。ＥｔＯＡｃで水性ワークアップして、黄褐色の残渣を得た。最大で８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、生成物を無色の固形物として得た（５３ｍｇ、２３％）。LCMS: [M + H] = 372; 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.65 - 7.52 (m, 2H), 7.10 - 6.95 (m, 3H), 5.15 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.24 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.92 - 2.83 (m, 2H), 2.40 - 2.30 (m, 1H), 2.20 - 2.10 (m, 2H), 1.68 - 1.53 (m, 1H).]
[0090] （実施例４）



（６，９−トランス）−２−シアノ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１００ｍＬの丸底フラスコに、（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−２−カルボニトリル（５２.６ｍｇ、０.１７５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）および４−ニトロフェニル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２０１ｍｇ、０.５２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２ｍＬ）を加え、黄褐色の懸濁液を得た。ＮａＨ（４２.０ｍｇ、１.７５２ｍｍｏｌ）（過剰量）を一度に加えた。混合液を窒素下、室温で終夜かけて１６時間、攪拌した。ＬＣＭＳは完全な変換を示した。それを水でクエンチし（気体発生）、ＥｔＯＡｃで抽出した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。最大で１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製して、生成物を白色の粉末として得た（７６ｍｇ、７２％）。LCMS: [M + H] = 545; 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.07 (br, 1H), 7.75 - 7.24 (m, 4H),7.20 - 6.90 (m, 4H), 5.98 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.83 - 4.20 (m, 3H), 3.40 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 3.28 - 2.75 (m, 3H), 2.60 - 2.10 (m, 5H), 2.10 - 1.78 (m, 4H).]
[0091] （中間体１８）



２−ブロモ−３−ビニルピリジン［Spivey, A.C.; Shukla, L.; Hayler, J.F. Org. Lett. 2007, 9, 891-894. を参照］
ブチルリチウム（２２.７５ｍＬ、５９.１ｍｍｏｌ）を、メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（２１.１３ｇ、５９.１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ懸濁液（４５０ｍＬ）に０℃で加えた。溶液が橙色に変わり、反応液を３０分間、室温に戻し、０℃に冷却した。２−ブロモニコチンアルデヒド（１０ｇ、５３.８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液をカニューレによって反応溶液に加えた。沈殿物が形成し、反応液を室温まで上げた。反応液の色は緑がかった灰色に変わった。しばらくして、反応液の色は再び橙色になった。反応液を室温で週末かけて攪拌した。溶媒をほとんど減圧下で除去し、粗製物を水およびジエチルエーテルで分液処理した。有機層を分離し、水層をジエチルエーテルで２回、抽出した。ジエチルエーテル層を合わせて、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムによって、酢酸エチルのヘキサン溶液（１０％）で溶離して、生成物を黄色の油状物として得た（８.７８ｇ、８９％）。MS(ESI)[M+H+] = 184.04; 1H NMRδ ppm (400MHz,クロロホルム-d) 8.21 - 8.29 (m, 1 H) 7.78 (dd, J=7.68, 1.89 Hz, 1 H) 7.20 - 7.28 (m, 1 H) 6.96 (dd, J=17.37, 11.08 Hz, 1 H) 5.72 (d, J=17.37 Hz, 1 H) 5.46 (d, J=11.08 Hz, 1 H).]
[0092] （中間体１９）



２−（ペンタ−４−エンイル）−３−ビニルピリジン
５００ｍＬの丸底フラスコに、２−ブロモ−３−ビニルピリジン（４.１５１ｇ、２２.５６ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＴＨＦ溶液（４０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（０.７８２ｇ、０.６７７ｍｍｏｌ）を窒素下で加えた。窒素下で攪拌しながら、４−ペンテニル亜鉛ブロミド（４６ｍＬ、２３.００ｍｍｏｌ）をシリンジで加え、得られた濃い混合液を室温で５分間、攪拌した。次いで、それを終夜、加熱還流（７０℃）した（４：００ｐｍ）。１７時間後、ＬＣＭＳは、目的生成物への完全な変換を示した。ＴＨＦを取り除いた。反応液をＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄色の油状物を得た。最大で３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣによって、目的生成物を無色の油状物として得た（２.５４ｇ、６５％）。MS(ESI)[M+H+] = 174; 1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.39 (dd, J=4.78, 1.51 Hz, 1 H) 7.69 (dd, J=7.81, 1.76 Hz, 1 H) 7.07 (dd, J=7.81, 4.78 Hz, 1 H) 6.89 (dd, J=17.37, 11.08 Hz, 1 H) 5.80 (dddd, J=17.06, 10.26, 6.67, 6.55 Hz, 1 H) 5.62 (d, J=17.37 Hz, 1 H) 5.34 (d, J=11.08 Hz, 1 H) 4.85 - 5.09 (m, 2 H) 2.76 - 2.92 (m, 2 H) 2.11 (q, J=7.13 Hz, 2 H) 1.67 - 1.83 (m, 2 H); 13C NMR (101 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 159.17 (s, 1 C) 148.31 (s, 1 C) 138.38 (s, 1 C) 133.22 (s, 1 C), 133.19 (s, 1C), 131.73 (s, 1 C) 121.40 (s, 1 C) 117.22 (s, 1 C) 114.87 (s, 1 C) 34.99 (s, 1 C) 33.64 (s, 1 C) 28.60 (s, 1 C).]
[0093] 中間体２０



（Ｚ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２Ｌの丸底フラスコに、２−（ペンタ−４−エンイル）−３−ビニルピリジン（２.１ｇ、１２.１２ｍｍｏｌ）のエーテル溶液（４ｍｌ）を加え、無色の溶液を得た。ＨＣｌ（３０ｍＬ、６０.０ｍｍｏｌ）を加え、混合液を５分間、攪拌した。揮発物を蒸発させ、無色の油状物を得た。次いで、それを乾燥ベンゼンと共沸させて、白色の固形物を得た。次いで、それをＣＨ２Ｃｌ２（１Ｌ）中に溶解して（アルゴンで脱気）、無色の溶液を得た。グラブスＩＩ（０.５１５ｇ、０.６０６ｍｍｏｌ）を加え、混合液を攪拌しながら、窒素下、５時間、４０℃の油浴で加熱した。ＬＣＭＳは、完全な変換を示した（ＴＬＣは、ＳＭよりも極性の小さい、主要なスポットを示した）。混合液を濃縮し、黄褐色の油状物を得た。それをＥｔＯＡｃに溶解し、少々のＮａＯＨ（０.５Ｎ）溶液と食塩水を含む飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣによって、目的生成物を黄褐色の油状物として得た（１.７９ｇ、９２％）。MS(ESI)[M+H+] = 146.06; 1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.20 (d, J=4.78 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 6.99 (dd, J=7.55, 5.04 Hz, 1 H) 6.21 (dt, J=12.28, 2.05 Hz, 1 H) 5.90 (dt, J=12.34, 4.41 Hz, 1 H) 2.93 - 3.06 (m, 2 H) 2.30 - 2.49 (m, 2 H) 1.82 - 2.02 (m, 2 H); 13C NMR (101 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 160.56 (s, 1 C) 146.26 (s, 1 C) 137.79 (s, 1 C) 134.18 (s, 1 C) 131.32 (s, 1 C) 127.24 (s, 1 C) 121.16 (s, 1 C) 39.10 (s, 1 C) 32.54 (s, 1 C) 24.87 (s, 1 C).]
[0094] （中間体２１）



６−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルアセテート
５００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｚ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（５.１６ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）、酢酸リチウム（９.３８ｇ、１４２ｍｍｏｌ）の酢酸溶液（１００ｍＬ）を加えて、窒素下、黄褐色の懸濁液を得た。Ｎ−ブロモアセトアミド（５.００ｇ、３６.２ｍｍｏｌ）を加えた。フラスコをアルミホイルでくるみ、混合液を室温で終夜、攪拌した。１６時間後、固形物は残っておらず、ＬＣＭＳは目的の、メジャーなピークとして、より極性の大きい生成物への完全な変換を示した。ＡｃＯＨを減圧下で取り除いた。残渣を水およびＥｔＯＡｃで希釈した。Ｎａ２ＣＯ３を加え、気体が発生しなくなるまで混合液を中性化した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、濃い黄褐色の油状物を得た（１０.５ｇ、１００％）。粗製のまま用いた。MS(ESI)[M+H+] = 284.17.]
[0095] （中間体２２）



６−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルアセテートエポキシド
５００ｍＬの丸底フラスコに、６−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イル アセテート（１０.０９ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。ナトリウムメトキシド（９.５９ｇ、１７８ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で窒素下、攪拌した。２時間後、ＴＬＣは、より極性の大きい生成物スポットへの完全な変換を示した。２.５時間後、ＴＨＦを取り除き、残渣を水およびＥｔＯＡｃで分液処理した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（５.７１ｇ、１００％）。それを、次の反応でそのまま用いた。MS(ESI)[M+H+] = 162.21.]
[0096] （中間体２３）



６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール
５００ｍＬの丸底フラスコに、エポキシド（５.７２ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１.８８９ｇ、１.７７５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液（１００ｍＬ）を加え、黒い懸濁液を得た。それを１ａｔｍ水素（バルーン）下で２時間、攪拌した。ＬＣＭＳは、わずかなｓｍが残っていることを示した。さらなるＰｄ／Ｃ（０.９５ｇ）を加え、さらに１時間、攪拌を続けた。ＴＬＣは変化を示さなかった（トレースはｓｍでなかったかもしれない）。それを濾過し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（６ｇ、１００％）。それを次の反応で使用したが、さらなる精製および測定をしなかった。]
[0097] （中間体２４）



８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６（７Ｈ）−オン
オーブン乾燥した５００ｍＬの丸底フラスコに、シュウ酸クロリド（３.４２ｍＬ、３９.１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１００ｍＬ）を加えて、−５５℃の窒素下で、無色の溶液を得た。ＤＭＳＯ（５.５４ｍＬ、７８ｍｍｏｌ）を１０分以上、滴下して加えた。溶液をさらに３０分間、攪拌した後、６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール（５.７９ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）を溶解した２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２溶液（＋２０ｍｌ洗浄液）を、カニューレで５分以上、加えた。反応混合物を−５０〜−５５℃でさらに４０分間、攪拌した（溶液が乳白色に変わった）。Ｅｔ３Ｎ（２４.７４ｍＬ、１７８ｍｍｏｌ）を−５０℃、シリンジで加え、反応液を３０分間、攪拌した（ゲル様で攪拌するのが難しく、周囲温度で適宜、振盪する必要があった）。１００ｍｌの水を加え、層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物をいくらかの固形物をともに得た。最大で１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製して、目的生成物を橙色の油状物として得た（４.９４７ｇ、４段階で８６％）。1H NMR(500MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.28 - 8.38 (m, 1 H) 7.37 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.00 - 7.13 (m, 1 H) 3.65 (s, 2 H) 3.10 - 3.18 (m, 2 H) 2.50 - 2.60 (m, 2 H) 2.01 (dd, J=6.71, 4.88 Hz, 2 H); 13C NMR (126 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 207.23 (s, 1 C) 160.24 (s, 1 C) 147.98 (s, 1 C) 137.20 (s, 1 C) 128.85 (s, 1 C) 122.25 (s, 1 C) 48.89 (s, 1 C) 43.96 (s, 1 C) 36.15 (s, 1 C) 24.70 (s, 1 C).]
[0098] （中間体２５）



６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール
オーブン乾燥した５００ｍＬの丸底フラスコに、ＢｕＬｉ（１７.１９ｍＬ、４３.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）を加えて、無色の溶液を−７８℃の窒素下で得た。１−ブロモ−２，３−ジフルオロベンゼン（４.８１ｍＬ、４３.０ｍｍｏｌ）をシリンジから滴下して加えた。混合液を−７８℃で２０分間、攪拌し、８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６（７Ｈ）−オン（４.９４７ｇ、３０.７ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸および高減圧下で乾燥）を溶解したＴＨＦ溶液（１０ｍｌ）をカニューレで滴下して加えた（＋１０ｍｌＴＨＦ洗浄液）。混合液を室温で１時間、加温した。ＴＬＣは、わずかに極性の大きいスポットへの変換をいくらか示した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチした後、ＴＨＦを取り除いた。残っている混合物を水およびＥｔＯＡｃで分液処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃い油状物に濃縮した。残渣を最大で１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２のＦＣＣにより精製した（非常に難しい分離）。不純なフラクションをプールし、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２から純粋なＥｔＯＡｃまでＦＣＣにより精製した。回収ＳＭ：１.８８g（３８％）。生成物フラクションをプールし、濃縮し、黄褐色の固形物を得た。それを繰り返しＥｔ２Ｏで洗浄し、黄褐色の固形物を得た（１.７９ｇ、２１％）。1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.27 (dd, J=4.91, 1.38 Hz, 1 H) 7.38 - 7.47 (m, 1 H) 7.30 - 7.35 (m, 1 H) 6.97 - 7.12 (m, 3 H) 3.93 (dd, J=14.60, 2.52 Hz, 1 H) 3.06 - 3.20 (m, 2 H) 2.86 (dd, J=14.60, 1.76 Hz, 1 H) 2.37 - 2.68 (m, 2 H) 1.68 - 1.94 (m, 2 H) 1.17 (t, J=7.05 Hz, 1 H).]
[0099] （中間体２６および２７）



（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジンおよび（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２５０ｍＬの丸底フラスコ中に、６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール（１.２３ｇ、４.４７ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＣｌ（２０ｍＬ、６Ｍ溶液、１２０ｍｍｏｌ）を加え、混合液を１００℃（還流）で２時間、加熱した。ＬＣＭＳは、完全で明瞭な変換を示した。室温に冷却後、それをＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ（１５ｍｌ、１０Ｎ）でゆっくり塩基性化した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液のＦＣＣにより、メジャーなピーク（１）（０.７１ｇ）並びにマイナーなピーク（２）（９０ｍｇ）およびそれらの２つの混合物を得た（０.３４ｇ）。全体で、１.１４ｇ（９７％：約７５％が１であり、２２％が２）。１H NMRは、いずれの構造も確認した。（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（１）：1H NMR (400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.33 (dd, J=5.04, 1.51 Hz, 1 H) 7.40 - 7.51 (m, 1 H) 6.98 - 7.18 (m, 4 H) 6.53 (s, 1 H) 3.04 - 3.22 (m, 2 H) 2.63 (t, J=6.55 Hz, 2 H) 2.17 - 2.32 (m, 2 H). 一方、（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（２）：1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.35 (dd, J=4.91, 1.38 Hz, 1 H) 7.39 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 6.81 - 7.10 (m, 4 H) 5.67 (t, J=4.28 Hz, 1 H) 3.73 (s, 2 H) 3.23 - 3.34 (m, 2 H) 2.48 - 2.65 (m, 2 H).]
[0100] （中間体２８）



６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２５０ｍＬの丸底フラスコに、（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（１１２ｍｇ、０.４３５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液（４ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。Ｐｄ／Ｃ（４６.３ｍｇ、０.０４４ｍｍｏｌ）を加え、混合液を水素バルーン下、２時間、攪拌した。ＴＬＣはｓｍとしてのメジャーなピークを１つ示し、ＬＣＭＳはｓｍおよび生成物親イオンのいずれもを示したものの、ともに溶出した。さらなる２３ｍｇのＰｄ／Ｃを加え、混合液を水素下で終夜、攪拌した（１９時間）。ＬＣＭＳは完全な変換を示した（単一のピークで１つの生成物のみ：Ｍ＋Ｈ＝２６０）。それを濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。溶液を濃縮し、無色の油状物を得た（１０６ｍｇ、９４％）。粗１H NMRによってその構造を確認し、優れた純度を示した。1H NMR (400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.30 (dd, J=4.78, 1.51 Hz, 1 H) 7.35 (dd, J=7.55, 1.51 Hz, 1 H) 6.89 - 7.12 (m, 4 H) 3.17 - 3.31 (m, 1 H) 3.01 - 3.17 (m, 2 H) 2.88 - 3.00 (m, 1 H) 2.74 (d, J=14.10 Hz, 1 H) 2.01 - 2.19 (m, 2 H) 1.85 - 2.01 (m, 1 H) 1.46 - 1.70 (m, 1 H).]
[0101] （中間体２９および３０）



ラセミ体、トランス−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オールおよびシス−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
１００ｍＬの丸底フラスコに、６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（１０６ｍｇ、０.４０９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（４ｍｌ）を加え、無色の溶液を得た。ｍＣＰＢＡ（１３７ｍｇ、０.６１３ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を室温で終夜、攪拌した。１９時間後、ＬＣＭＳは、Ｎ−オキシドへの完全な変換を示した。混合液をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＮのＮａＯＨ溶液で洗浄した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、白色の固形物を得た。それを、さらなる精製および特徴化をせずに、次の反応で用いた。MS(ESI)[M+H+]=276.13. １００ｍＬの丸底フラスコ中に、６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン１−オキシド（１１３ｍｇ、０.４０９ｍｍｏｌ）（淡黄色の油状物、乾燥ベンゼンと共沸）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（４ｍＬ）を加え、淡黄色の溶液を得た。０℃に冷却後、ＴＦＡＡ（０.１４４ｍＬ、１.０２３ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で４時間、攪拌した。ＬＣＭＳは、わずか１０％の目的生成物しか示さず、主にＳＭ（または、アシル化Ｎ−オキシドであったかもしれない、遅い転位）であった。さらなるＴＦＡＡ（０.１５ｍｌ）を加え、混合液を室温で終夜、攪拌した。ＬＣＭＳの結果は、少し良くなった。混合液を４５℃で４時間、還流したが、反応は改善されなかった。揮発物を除去し、２ｍｌ無水酢酸を加え、混合液を１３０℃（予熱した浴）で１.５時間、加熱した。ＬＣＭＳは、ｓｍを全く示さなかった。それを冷却して、ＥｔＯＡｃで希釈した。ＮａＯＨ溶液で塩基性化し、層を分離した。有機層を水で洗浄し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。それをＴＨＦ（２ｍｌ）に溶解し、ＮａＯＨ（１.５ｍｌ、１Ｎ）で１時間処理した。ＬＣＭＳは、目的生成物として、主に１つのピークを示した（Ｍ＋Ｈ＝２７６）。混合液をＥｔＯＡｃおよび水で分液処理した。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、化合物（ＴＬＣでとても近いスポット）ａおよびｂの２つを得た。最大で８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでさらに溶離して、より極性の大きいピークをｃとして得た。１H NMRで証明されたように、ａは目的のトランス−アルコール（３２.３ｍｇ、２９％）（分析データは、前述したのと一致）；ｂは脱水生成物（１０.４ｍｇ、９.９％）；並びにｃはシス−アルコール（３６ｍｇ、３２％）であった。シス−アルコールは、トランス−アルコールよりもかなり極性が大きい（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶液中において、Ｒｆ＝０.１６がシスであり、０.７７がトランス）。シス−アルコールに関する１H NMR：1H NMR (500MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.26 (d, J=4.58 Hz, 1 H) 7.30 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.04 (dd, J=7.32, 4.88 Hz, 1 H) 6.85 - 6.98 (m, 2 H) 6.79 (t, J=6.87 Hz, 1 H) 5.37 (br. s., 1 H) 5.01 (dd, J=7.17, 3.81 Hz, 1 H) 3.28 - 3.52 (m, 2 H) 2.93 (d, J=13.73 Hz, 1 H) 2.17 - 2.33 (m, 1 H) 1.89 - 2.15 (m, 3 H).]
[0102] （中間体３１）



（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
２５０ｍＬの丸底フラスコに、（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（５４６ｍｇ、２.１２２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１５ｍｌ）を加え、無色の溶液を得た。ｍＣＰＢＡ（５７１ｍｇ、２.５５ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を室温で終夜、攪拌した。４時間後、ＬＣＭＳは、トレースＳＭのみが残っていることを示した。２１時間後、混合液をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＮのＮａＯＨ溶液で洗浄した。有機層を水、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、濃い油状物を得た（１００％）。それをさらなる精製および特徴化をせずに、次の反応で用いた。MS(ESI)[M+H+] = 274.19. 参照：Kaiser, S.; Smidt, S.P.; Pfaltz, A. Angew. Chem. Int. Ed. 2006, 45, 5194-5197. １００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン １−オキシド（０.５８０ｇ、２.１２２ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１６ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。０℃に冷却後、ＴＦＡＡ（０.７４９ｍＬ、５.３１ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で４時間、攪拌した。それを週末かけて、冷蔵庫に置いた。ＬｉＯＨ（６.３７ｍＬ、６.３７ｍｍｏｌ）を加え、混合液を２時間、攪拌した。それをＥｔＯＡｃおよび水で希釈し、層を分離した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、生成物を黄色がかった油状物／固形物として得た（０.４ｇ、２段階で６９％）。MS(ESI)[M+H+] = 274.19; 1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.36 (dd, J=4.78, 1.51 Hz, 1 H) 7.50 (dd, J=7.81, 1.26 Hz, 1 H) 7.20 (dd, J=7.68, 4.91 Hz, 1 H) 6.96 - 7.11 (m, 3 H) 6.44 (s, 1 H) 5.63 (br., 1 H) 4.77 (dd, J=10.45, 2.64 Hz, 1 H) 2.78 - 2.95 (m, 1 H) 2.64 - 2.77 (m, 1 H) 2.44 - 2.62 (m, J=13.60, 5.48, 5.48, 2.64 Hz, 1 H) 1.92 - 2.15 (m, 1 H); 13C NMR (101 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 158.49 (s, 1 C) 149.39 - 152.62 (m, 1 C) 146.03 - 149.25 (m, 1 C) 145.24 (s, 1 C) 143.70 (s, 1 C) 139.94 (s, 1 C) 138.79 (s, 1 C) 134.46 (d, J=10.79 Hz, 1 C) 128.51 (d, J=11.56 Hz, 1 C) 124.37 (br. s., 1 C) 123.81 - 124.14 (m, 1 C) 122.44 (s, 1 C) 116.24 (d, J=16.95 Hz, 1 C) 71.49 (s, 1 C) 34.88 (s, 1 C) 32.74 (d, J=3.08 Hz, 1 C).]
[0103] （中間体３２および３３）



ラセミ体、トランス−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール、およびシス−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
５００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール（６６０ｍｇ、２.４１５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液（２０ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。Ｐｄ／Ｃ（２５７ｍｇ、０.２４２ｍｍｏｌ）を加え、混合液を水素バルーン下、４時間、攪拌した。ＬＣＭＳは完全な変換を示した。濾過し、濃縮して、無色の油状物を得た。最大で８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、２つの生成物を得た：トランス−アルコール（１０４.３ｍｇ、１６％）およびシス−アルコール（４９２.８ｍｇ、７４％）であり、いずれも白色の固形物として得た。いずれのアルコールについても、分析データは前述したのと一致した。]
[0104] （中間体３４）



ラセミ体（６，９−トランス−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
１００ｍＬの丸底フラスコに、（６，９−シス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール（４８９ｍｇ、１.７７６ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＴＨＦ溶液（１５ｍＬ）を加え、無色の溶液を得た。４−ニトロ安息香酸（５９４ｍｇ、３.５５ｍｍｏｌ）およびＰｈ３Ｐ（９３２ｍｇ、３.５５ｍｍｏｌ）を加え、混合液を０℃に冷却した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０.６９９ｍＬ、３.５５ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。混合液を室温まで加温し、５時間、攪拌した。ＬＣＭＳは目的の中間体への完全な変換およびわずかな脱水生成物を示した。それを終夜、攪拌したままにしたところ、ＬＣＭＳは変換を示さなかった。ＬｉＯＨ（８.８８ｍＬ、８.８８ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で３時間、攪拌した。ＬＣＭＳは、中間体から生成物への完全な変換を示した。ＴＨＦを取り除き、残渣をＥｔＯＡｃおよび０.２ＮのＮａＯＨで分液処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、わずかに黄褐色の油状物を得た。最大で５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより、目的生成物を白色の固形物として得た（３７８ｍｇ、７７％）。分析データは前述したのと一致した。]
[0105] （中間体３５）



トリイソプロピル（１−（２−ビニルフェニル）ペンタ−４−エンイルオキシ）シラン
１−ブロモ−２−ビニルベンゼン（２.８１４６ｇ、１５.３８ｍｍｏｌ）を乾燥ベンゼンで２回共沸させてから、ＴＨＦ（５０ｍｌ）中に取り込んだ。溶液を−７８℃に冷却した。ＢｕＬｉ（６.７７ｍＬ、１６.９１ｍｍｏｌ）を−７８℃で反応混合液に加え、その温度で２０分間、攪拌した。ペンタ−４−エンアール（enal）（１.６７０ｍＬ、１６.９１ｍｍｏｌ）を反応混合液に加え、浴温度を徐々に加温しながら、４時間、攪拌した。クロロトリイソプロピルシラン（３.５８ｍＬ、１６.９１ｍｍｏｌ）を反応混合液に加え、反応液を室温に加温しながら、終夜、攪拌した。溶媒を主に減圧下で除去し、粗製物を酢酸エチルおよび水で分液処理した。酢酸エチル層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。生成物をフラッシュカラムにより得て、０〜３０％エーテルのヘキサン溶液中で溶離した（３.９ｇ、収率７４％）。MS(ESI)[M+H+] = 346.46.]
[0106] （中間体３６）



（Ｚ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
塩化水素（５.６４ｍＬ、１１.２８ｍｍｏｌ）（１０ｍＬ、２Ｍのジエチルエーテル溶液中）を、２−（１−（トリイソプロピルシリルオキシ）ペンタ−４−エンイル）−３−ビニルピリジン（３.９ｇ、１１.２８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２５ｍＬ）に加えた。溶媒を減圧下で除去し、対応するＨＣｌ塩をベンゼンで２回共沸した。反応液をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）で満たし、Ｎ２で１０分間、パージし、Ｇｒｕｂｂ ＩＩ（０.１９２ｇ、０.２２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を４０℃で３時間、加熱し、ＬＣＭＳは出発物質が残っていないことを示した。反応液を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で１回、洗浄した。ＣＨ２Ｃｌ２を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。０〜２５％エーテルのヘキサン溶液によるフラッシュカラムによって、目的生成物を黄色の油状物として得た（２.５４ｇ、収率７１％）。MS(ESI)[M+H+] = 318.35.]
[0107] （中間体３７）



６−ブロモ−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルアセテート
Ｎ−ブロモアセトアミド（２.０２１ｇ、１４.６５ｍｍｏｌ）を、（Ｚ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（４.５５９７ｇ、１４.３６ｍｍｏｌ）および酢酸リチウム（３.７９ｇ、５７.４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ懸濁液（１００ｍＬ）に、室温のＮ２下で加えた。フラスコをアルミホイルで包み、室温で終夜、攪拌した。反応液は、清澄な黄色の溶液になった。溶媒を高減圧下で蒸発させた。粗製物を、水および酢酸エチルで分液処理した。Ｎａ２ＣＯ３を加え、バブリングがなくなった。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで再び抽出した。有機層を合わせて、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮し、黄褐色の油状物を得た（粗生成物：６.３７ｇ）。粗製のまま用いた。MS(ESI)[M+H+] = 458.36.]
[0108] （中間体３８）



６−ブロモ−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルアセテートエポキシド
ナトリウムメトキシド（３.７７ｇ、６９.８ｍｍｏｌ）を、６−ブロモ−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イル アセテート（６.３７ｇ、１３.９５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）に、室温のＮ２下で加えた。反応液を２時間、攪拌した。ＴＬＣは出発物質を全く示さず、生成物は出発物質よりも極性の大きいスポットを有した。溶媒を減圧下で除去し、粗製物を酢酸エチルおよび水で分液処理した。水層を酢酸エチルで再び抽出した。有機層を合わせて、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮し、粗生成物を黄褐色の油状物として得た（粗生成物：４.２２ｇ、９１％）。MS(ESI)[M+H+] = 334.30.]
[0109] （中間体３９）



９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール
エポキシド（４.２２ｇ、１２.６５ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（０.４５ｇ、０.４２３ｍｍｏｌ）を混合したＭｅＯＨ溶液（１００ｍＬ）を、２時間、Ｈ２バルーンによって室温で水素化した。ＴＬＣは出発物質を全く示さず、目的生成物としてより極性の大きいスポットを示した。反応液をシリカパッドで濾過し、メタノールで洗浄した。濾液を濃縮し、目的生成物を黄褐色の油状物として得た（粗４.１ｇ、９７％）。MS(ESI)[M+H+] = 336.37.]
[0110] （中間体４０）



９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６（７Ｈ）−オン
オーブン乾燥した５００ｍＬ丸底フラスコに、Ｎ２下で、シュウ酸クロリド（６.４９ｍＬ、７２.９ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）を充填した。フラスコを−６０℃に冷却し、ＤＭＳＯ（６.９０ｍＬ、９７ｍｍｏｌ）を反応混合液に滴下して加えた。添加後、反応液を−６０℃で３０分間、攪拌し、９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−オール（８.１５５７ｇ、２４.３１ｍｍｏｌ）（２０ｍＬＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、２０ｍＬＣＨ２Ｃｌ２ですすぐ）をカニューレにより−６０℃で、反応混合液に加えた。反応液を−５５℃で４０分間、攪拌し、ＴＥＡ（１６.９４ｍＬ、１２２ｍｍｏｌ）を添加した。反応は、濃い懸濁液を形成したように見えた。反応液を１時間、攪拌し、水を反応混合液に加えた。有機層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２で２回、抽出した。ＣＨ２Ｃｌ２層を合わせて、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。２５％〜５０％酢酸エチルのヘキサン溶液のフラッシュカラムによって、生成物を黄色の油状物として得た（１.４９ｇ、１８.４％）。MS(ESI)[M+H+] = 334.30; 1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.36 (d, J=5.04 Hz, 1 H) 7.46 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.16 (dd, J=7.55, 4.78 Hz, 1 H) 5.22 (dd, J=4.78, 2.27 Hz, 1 H) 4.66 (d, J=14.35 Hz, 1 H) 3.26 (d, J=14.60 Hz, 1 H) 2.94 - 3.05 (m, 1 H) 2.42 - 2.55 (m, 1 H) 2.36 (dd, J=14.10, 5.04 Hz, 1 H) 2.03 - 2.17 (m, 1 H) 1.03 - 1.16 (m, 3 H) 0.96 - 1.00 (m, 9 H) 0.89 - 0.92 (m, 9 H).]
[0111] （中間体４１）



（Ｅ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−イルトリフルオロメタンスルホネート
ＬＤＡ（３.７３ｍＬ、７.４５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＰＵ（２.０７３ｍＬ、１７.２０ｍｍｏｌ）および９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６（７Ｈ）−オン（１.９１１９ｇ、５.７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２５ｍＬ）に−７８℃で加えた。反応液を該温度で２時間、攪拌し、１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−（トリフルオロメチルスルホニル）メタンスルホンアミド（２.６６ｇ、７.４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を徐々に室温に加温しながら、終夜、攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗製物をフラッシュカラムに充填し、０〜１５％〜２５％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶離して、目的生成物を得た（２.３ｇ、８６％）。MS(ESI)[M+H+] = 466.33; 1H NMR(400MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.37 (dd, J=4.78, 1.51 Hz, 1 H) 7.47 - 7.54 (m, 1 H) 7.20 (dd, J=7.81, 4.78 Hz, 1 H) 6.43 (d, J=2.01 Hz, 1 H) 5.26 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 3.16 - 3.32 (m, 1 H) 2.58 - 2.69 (m, 1 H) 2.29 - 2.39 (m, 1 H) 1.85 - 1.98 (m, 1 H) 1.01 - 1.09 (m, 3 H) 0.93 - 1.00 (m, 9 H) 0.85 (d, J=7.05 Hz, 9 H).]
[0112] （中間体４２）



（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２，３−ジフルオロフェニルボロン酸（０.９３６ｇ、５.９３ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（４.５７ｍＬ、９.１４ｍｍｏｌ）、（Ｅ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−６−イルトリフルオロメタンスルホナート（２.３ｇ、４.９４ｍｍｏｌ）、およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０.２８５ｇ、０.２４７ｍｍｏｌ）を混合した、トルエン（３０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（６ｍＬ）溶液を、８０℃のＮ２で３時間、加熱した。ＬＣＭＳは、出発物質を全く示さなかった。反応液を酢酸エチルで希釈し、水で１回洗浄した。酢酸エチル層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。０〜２５％酢酸エチルのヘキサン溶液のフラッシュカラムにより、目的生成物を得た（０.８７９７ｇ、５４％）。MS(ESI)[M+H+] = 430.43.]
[0113] （中間体４３）



（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
（Ｅ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン（１.６０７２ｇ、３.７４ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＦ（７.４８ｍＬ、７.４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ混合液（１０ｍＬ）を室温で１時間、攪拌した。ＬＣＭＳは出発物質を全く示さず、目的生成物への変換を示した。溶媒を減圧下で除去した。反応液をフラッシュカラムで精製し、０〜３５％〜５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶離し、目的生成物を白色の固形物として得た（０.８２５ｇ、８１％）。全ての分析データは、前述したものと一致した。]
[0114] （中間体４４）



（Ｒ）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン
１Ｌの丸底フラスコに、（Ｓ）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン（１９.１４ｇ、１０８ｍｍｏｌ）（ジケトンの酵素還元により得た）のＴＨＦ溶液（３００ｍＬ）を加え、淡橙色の溶液を得た。４−ニトロ安息香酸（２７.１ｇ、１６２ｍｍｏｌ）およびＰｈ３Ｐ（４２.５ｇ、１６２ｍｍｏｌ）を窒素下で加え、混合液を０℃に冷却した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（３１.９ｍＬ、１６２ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。混合液を徐々に室温に加温し、終夜、攪拌した（５：００ｐｍ）。色は黄褐色に変わった。１５時間後、ＬＣＭＳは完全な変換を示した。水（８０ｍｌ）を加え、ＬｉＯＨ（７.７６ｇ、３２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を室温で２時間、攪拌した（ＬｉＯＨの一部は完全に溶解しなかった）。２時間後、ＬＣＭＳは完全な変換を示した（統合して、生成物／脱水〜７／１）。ＴＨＦを取り除き、残った混合液を４０ｍＬの濃ＨＣｌ（１２Ｎ）でゆっくり酸性化した。ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）を加えた。混合液を１Ｌの分液漏斗で振盪した（より良い分離をするために、１０ｍｌのヘキサンを加えた）。層を分離し、有機層を水で抽出した（２×５０ｍＬ）。水層を合わせて、ＥｔＯＡｃで洗浄した（４×１００ｍＬ）。次いで、黄褐色の水溶液を５０ｍＬのＮａＯＨ（１０Ｎ）でゆっくり塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（４×１５０ｍＬ）で抽出した。水層をＮａＣｌで飽和し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。黄褐色の有機層を合わせて［ＴＬＣは目的生成物、脱水化生成物、およびいくらかのベースライン（baseline）を示した］、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（粗重量：１９.２４ｇ、１００％）。それを次の工程でそのまま用いた。MS(ESI)[M+H+] = 178.24.]
[0115] （中間体４５）



（Ｒ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン
１Ｌの丸底フラスコに、（Ｒ）−９−ヒドロキシ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン（１９.１４ｇ、１０８ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。０℃に冷却後、ＴＩＰＳ−ＯＴｆ（２９.３ｍＬ、１０８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３０.１ｍＬ、２１６ｍｍｏｌ）をシリンジによって加え、混合液を０℃で１時間、攪拌した。ＬＣＭＳは変換が完了したことを示した。揮発物を除去し、残渣をＮａＨＣＯ３溶液およびＥｔＯＡｃで分液処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（３７ｇ）。それを最大で２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、生成物を白色の固形物として得た（２６.３ｇ、２段階で７３％）。MS(ESI)[M+H+] = 334.37.]
[0116] （中間体４６）



（６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン［Fox, J.M.; Huang, X.; Chieffi, A.; Buchwald, S.L. J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 1360-1370 を参照］
オーブン乾燥した１Ｌフラスコで、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１３.１９ｇ、１３７ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０.９４８ｇ、４.２２ｍｍｏｌ）、および２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’−メチルビフェニル（１.５３９ｇ、４.２２ｍｍｏｌ）を、窒素バッグ中で秤量した。（Ｒ）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン（３５.２１ｇ、１０６ｍｍｏｌ）、トルエン（１０６ｍＬ）（窒素ガスによって、もとのボトル中で脱気）、および１−ブロモ−２，３−ジフルオロベンゼン（１４.１８ｍＬ、１２７ｍｍｏｌ）を窒素下で加えた。予熱した油浴中、フラスコを８０℃で２０時間、攪拌した。揮発物を除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）および水（４００ｍｌ）で分液処理した。層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、濃い油状物を得た。それをシリカゲルプラグに通した［ＣＨ２Ｃｌ２で充填し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（最大で３０％ＥｔＯＡｃ）で溶離した］。粗生成物を濃い赤色の油状として得た（８６％質量回復）。１H NMRは、目的トランス異性体とシス異性体の比率が約６／１であることを示した。MS(ESI)[M+H+] = 446.21.]
[0117] （中間体４７）



（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
２５０ｍＬの丸底フラスコに、（９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン（９.５９ｇ、２１.５２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液（５０ｍＬ）を加え、淡黄色の溶液を得た。ＮａＢＨ４（１.６２８ｇ、４３.０ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温で４０分間、攪拌した。ＬＣＭＳは、完全な変換を示した（異性体の、メジャーなピークおよびマイナーなピーク）。１時間後、ＭｅＯＨを減圧下で取り除き、残渣を水およびＥｔＯＡｃで分液処理した。層を分離した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、淡黄色の油状物を得た（９.６３ｇ、１００％）。MS(ESI)[M+H+] = 448.40. ５００ｍＬの丸底フラスコに、（９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オール（９.６３ｇ、２１.５２ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１００ｍＬ）を加え、淡黄色の溶液を得た。０℃の氷浴中にに冷却後、Ｍｓ−Ｃｌ（１.８４５ｍＬ、２３.６７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９.００ｍＬ、６４.６ｍｍｏｌ）を窒素下、シリンジでゆっくり加えた。３０分後、冷却槽を除去し、混合液を室温で２時間、攪拌した（色は赤みがかかった黄褐色に変わった）。ＬＣＭＳは完全な変換を示した。溶媒を除去し、残渣をＮａＨＣＯ３溶液およびＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で分液処理した。層を分離した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄色の油状物を得て、終夜、乾燥した（１０.８２ｇ、９６％）。MS(ESI)[M+H+] = 526.28. ５００ｍＬの丸底フラスコに、（９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルメタンスルホナート（１１.３１ｇ、２１.５２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）を加え、淡黄色の溶液を得た。ＬＡＨ（１６.１４ｍＬ、３２.３ｍｍｏｌ）（２ＭのＴＨＦ溶液中）をシリンジで窒素下、ゆっくり加え、混合液を室温で１時間、攪拌した（赤色に変色）。ＬＣＭＳは変換が完了したことを示した。無水Ｎａ２ＳＯ４を加え、反応液をゆっくり水でクエンチした。ゲルが形成した。濾過および水性ワークアップを組み合わせて、淡黄色の油状物を得た。最大で７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製して、最初のピークである目的生成物を濃い黄褐色の油状物として得た（４日間かけて乾燥：１.４４ｇ、２４％）。１H NMRおよびHPLC／LCMS は、前述したラセミ体と一致した。最大で２２％の、様々な加水分解されたジオールを回収することができた。]
[0118] （中間体４８）



（５Ｓ，６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オール
１Ｌの丸底フラスコに、（９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オン（４８ｇ、１０８ｍｍｏｌ）のシクロペンチルメチルエーテル溶液（４００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。ＭｅＯＨ氷浴中で−１５℃に冷却後、水素化ホウ素リチウム（９.３９ｇ、４３１ｍｍｏｌ）を加え、混合液（不均一）を１０℃で４時間、徐々に加温し、室温で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳはとても良い変換を示した。それをＭｅＯＨ（３０ｍｌ）でゆっくりクエンチし、大部分の揮発物を高減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、よく攪拌しながら、ゆっくり水でクエンチした。混合液を室温で終夜、攪拌した。層を分離した。濃い有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、濃い油状物を得た（４８ｇ、１００％）。それを次の反応でそのまま用いた。MS (ESI)[M+H+] = 448.14.]
[0119] （中間体４９）



（５Ｓ，６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルメタンスルホネート
１Ｌの丸底フラスコに、（５Ｓ，６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−オール（４７.１７ｇ、１０５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＣ６Ｈ５ＣＦ３溶液（５００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。Ｍｓ−Ｃｌ（２４.６３ｍＬ、３１６ｍｍｏｌ）を窒素下、０℃、滴下漏斗で加え、続いてＥｔ３Ｎ（７３.４ｍＬ、５２７ｍｍｏｌ）を加えた（１１：００ａｍ）。Ｅｔ３Ｎを滴下添加した後、懸濁液を室温で２時間、攪拌した。ＬＣＭＳは、主要な生成物親イオンを示した（ＬＣＭＳでｓｍとオーバーラップ）。溶媒を除去し、残渣をＮａＨＣＯ３溶液（３００ｍｌ）でゆっくり処理した。ＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）を加えた。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮し、黄褐色の油状物を得た。それをさらなる精製および分析もせずに、次の反応で用いた。MS(ESI)[M+H+] = 526.14.]
[0120] （中間体５０）



（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン
２Ｌのフラスコ中に、（５Ｓ，６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−５−イルメタンスルホナート（５５.２ｇ、１０５ｍｍｏｌ）（乾燥ベンゼンと共沸）のＴＨＦ溶液を（３００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。スーパーヒドリド（５２５ｍＬ、５２５ｍｍｏｌ）（１.０ＭのＴＨＦ溶液）を窒素下、滴下漏斗で加え、混合液を室温で４時間、攪拌した。ＴＨＦを取り除き、黄褐色の油状物を水（３００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）で分液処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（約６０ｇ）。最大で３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのＦＣＣにより精製したが（２.５Ｌでパックしたカラム）、精製は上手く行かなかった。しかし、ベースライン（ＵＶ活性はあまりない）ジャンクは除去できた（シリカプラグのみを用い、＜１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで問題ない）。より極性の小さいフラクションを全て回収して合わせて、濃縮して、黄褐色の油状物を得た（３３.５８ｇ）。それを次の工程でそのまま用いた。MS(ESI)[M+H+] = 432.19.]
[0121] （中間体５１）



（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−オール
１Ｌの丸底フラスコに、（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−９−（トリイソプロピルシリルオキシ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン （１９.５８ｇ、４５.４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４００ｍＬ）を加え、黄褐色の溶液を得た。ＴＢＡＦ（５４.４ｍＬ、５４.４ｍｍｏｌ）をシリンジで加え、混合液を室温で終夜、攪拌した。１５時間後、ＬＣＭＳは変換が完了したことを示した。ＴＨＦを取り除いた。残渣を７８２１３−１００と合わせて、ＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）および水（３００ｍｌ）で分液処理した。層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、黄褐色の油状物を得た。最大で２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのグラジエントを有するＦＣＣにより注意深く精製して、わずかにより極性の小さいスポットを除去することができる。全ての生成物を、ＭｅＯＨからの再結晶にさらした。そして、Ｘ線構造を得た。ＴＩＰＳ−保護ヒドロキシケトンからの全収率は、２６％よりも多かった。全ての分析データは、前述したのと一致した。MS(ESI)[M+H+]=276.15; 1H NMR(500MHz,クロロホルム-d) δ ppm 8.45 (d, J=4.88 Hz, 1 H) 7.50 (d, J=7.63 Hz, 1 H) 7.20 (dd, J=7.48, 5.04 Hz, 1 H) 7.01 - 7.11 (m, 3 H) 4.92 (dd, J=11.29, 2.14 Hz, 1 H) 3.18 - 3.30 (m, 1 H) 2.90 - 2.99 (m, 1 H) 2.84 (d, J=14.04 Hz, 1 H) 2.33 - 2.43 (m, 1 H) 2.16 - 2.26 (m, 2 H) 1.56 - 1.73 (m, 1 H).]

权利要求:

請求項1
式Ｉ：［式中、Ｒ１は、水素、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルキルＳＯ２、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｎ−アルキルピペラジニル、またはモルホリニルであり；Ｒ２は、からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであるか；またはＲ２は、であり；Ｒ３は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、またはハロアルコキシであり；Ｒ４は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、またはハロアルコキシであり；Ａｒ１は、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、およびアルキルＳＯ２からなる群より選択される０〜３個の置換基で置換されたフェニルであり；Ｘは、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びにＹは、結合、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨである］の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項2
以下の立体化学：で表された請求項１の化合物。
請求項3
Ｒ１が、水素、ハロ、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであり；Ｒ２が、からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであり；Ｒ３が、水素またはハロであり；Ｒ４が、水素またはハロであり；Ａｒ１が、０〜２個のハロで置換されたフェニルであり；Ｘが、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びにＹが、Ｏである、請求項２の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項4
Ｒ１が、水素、クロロ、シアノ、アミノ、ジメチルアミノ、またはｔ−ブチルアミノであり；Ｒ２が、からなる群より選択される１個の置換基で置換されたピペリジニルであり；Ａｒ１が、フェニルまたはジフルオロフェニルであり；Ｘが、Ｏ、ＣＨ２、またはＮＨであり；並びにＹが、Ｏである、請求項３の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項5
Ｒ１が、水素、ハロ、またはシアノである、請求項１の化合物。
請求項6
Ｒ２が、Ｎ−ピペリジニルであって４−置換された、請求項１の化合物。
請求項7
置換基が、である、請求項６の化合物。
請求項8
Ａｒ１が、２個のハロ置換基で置換されたフェニルである、請求項１の化合物。
請求項9
Ａｒ１が、２，３−ジフルオロフェニルである、請求項１の化合物。
請求項10
Ｘが、Ｏである、請求項１の化合物。
請求項11
５−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−オキソシクロヘプチル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；並びに（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ２−オキソ−１，２−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−４，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートからなる群より選択される、請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項12
（６，９−トランス）−２−シアノ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６Ｒ，９Ｒ）−２−クロロ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６Ｓ，９Ｓ）−２−クロロ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６，９−トランス）−６−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６，９−トランス）−６−（２，５−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート； 並びに（６，９−トランス）−６−（３，４−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートからなる群より選択される、請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項13
１−（１−（２−（（６，９−シス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２（３Ｈ）−オン；１−（１−（２−（（６Ｒ，９Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２（３Ｈ）−オン；１−（１−（２−（（６Ｓ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２（３Ｈ）−オン；Ｎ−（（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）−４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド；並びにＮ−（（６Ｓ，９Ｓ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）−４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキサミドからなる群より選択される、請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項14
（６Ｒ，９Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６Ｒ，９Ｒ）−２−アミノ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；Ｎ−（（６Ｒ，９Ｒ）−３−アミノ−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル）−４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド；並びに（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−３−（ジメチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル ４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートからなる群より選択される、請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項15
（６，９−トランス）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イル４−（２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；並びにカリウム１−（１−（（（６Ｒ，９Ｒ）−６−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジン−９−イルオキシ）カルボニル）ピペリジン−４−イル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イドからなる群より選択される、請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項16
以下：の化合物またはその医薬的に許容される塩。
請求項17
医薬的に許容される塩がカリウムである、請求項１６の化合物。
請求項18
請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む組成物。
請求項19
請求項１の化合物が、またはその医薬的に許容される塩である、請求項１８の組成物。
請求項20
治療上有効な量の請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩を患者に投与することを特徴とする、ＣＧＲＰの異常量に関連する症状の治療方法。
請求項21
症状が片頭痛である、請求項２０の治療方法。
請求項22
請求項１の化合物が、またはその医薬的に許容される塩である、請求項２０の治療方法。
請求項23
症状が片頭痛である、請求項２２の治療方法。